小鼠子宫内膜胚胎着床点microRNAs的表达及其对胚胎着床的调控作用-猫眼课题宝

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课题基金

基金详情

小鼠子宫内膜胚胎着床点microRNAs的表达及其对胚胎着床的调控作用

结题报告

批准号：

31071278

项目类别：

面上项目

资助金额：

31.0 万元

负责人：

王应雄

依托单位：

重庆医科大学

学科分类：

C1207.受精、着床及母胎互作

结题年份：

2013

批准年份：

2010

项目状态：

已结题

项目参与者：

刘学庆、丁裕斌、骆明勇、余秋波、陈雪梅、高茹菲、鲁之中

关键词：

microRNA功能 microRNA芯片胚胎着床 microRNAs 小鼠

国基评审专家1V1指导中标率高出同行96.8%

中文摘要

胚胎着床是妊娠成功的关键环节，这一复杂的生殖过程涉及诸多因子的参与和协同作用，但其机制尚不清楚。现已证实miRNA在许多生命活动中发挥着重要的调控作用。新近，有研究提示：miRNAs可能参与了胚胎着床的调控，我们的预实验也支持这一设想。基于此，本研究采用miRNA芯片和基因芯片技术对妊娠小鼠子宫内膜胚胎着床点及其旁组织miRNA的表达和基因表达进行分析，筛选着床相关miRNA，并结合基因表达谱数据，运用生物信息学miRNA靶基因预测算法预测着床相关miRNA所调控的靶基因，并对此加以验证。此外，利用microRNA高效阻断剂Antagomir对所筛选的着床相关miRNA进行体内功能实验，探索其对胚胎着床的影响，从而更深入地认识miRNA在胚胎着床过程中的调控作用。

英文摘要

课题于2011年1月启动，并于2013年10月完成了合同任务书要求的全部研究内容，并新增了部分实验研究。.按照计划书内容，我们利用芯片技术构建了小鼠妊娠窗口期（孕5天）子宫内膜着床点及其旁组织的miRNA表达谱和基因表达谱，得到着床点上调的30个miRNAs和下调的42个miRNAs。利用生物信息学miRNA预测算法结合基因表达谱数据，得到miRNA在小鼠子宫内膜中的潜在靶基因。并通过体外转染实验，证实了miRNA对预测靶基因的调控和基质细胞的作用。通过体内功能实验，证实了miRNA参与调控胚胎着床。.新增实验包括①原位杂交实验：对miRNA在小鼠子宫内膜进行定位，以便预测其功能；②荧光素酶报告基因实验：证实miRNA与预测靶基因的靶向关系；③利用数据库GO和KEGG对负相关靶基因进行了功能和信号通路预测，以探讨miRNA可能的作用机制；④对miRNA及预测靶基因进行了负调控网络图绘制，以得到在胚胎着床中起关键作用的miRNA。.综合所有实验结果，查阅相关文献资料，我们得到如下结论：miRNA参与调控胚胎着床，其分子机制主要涉及细胞粘附和免疫相关信号通路。. 以上成果已撰写SCI论文3篇, 1篇发表在PLOS ONE，2篇发表在Reprodutive science，1篇在投

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