雌激素对绵羊输卵管上皮细胞防御素表达影响机理的研究

批准号：

31060328

项目类别：

地区科学基金项目

资助金额：

26.0 万元

负责人：

曹贵方

依托单位：

内蒙古农业大学

学科分类：

基础兽医学

结题年份：

2013

批准年份：

2010

项目状态：

已结题

项目参与者：

张福全、李海军、齐旺梅、包图雅、朱学敏、赵鹏伟、程兰玲、米焱、关洪敏

关键词：

上皮细胞雌激素绵羊输卵管防御素

项目摘要

结项摘要

项目成果

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中文摘要

防御素是动物黏膜免疫的重要组份，其广谱抗菌、免疫调节功能越来越得到关注。雌激素是一种作用广泛的类固醇类激素,对众多靶组织如生殖道、乳腺、骨骼等都有调节作用。雌激素能够促进生殖道上皮细胞防御素的表达已经被我们研究证实。提示雌激素参与了对生殖道上皮细胞的防御素表达调节过程，但雌激素如何实现调控？是否通过其受体实现其调控？生殖道黏膜免疫与生殖激素的关系如何？有关雌激素对绵羊β-防御素基因表达的信号通路和具体机制是什么？国内外均未见报道。本项目采用细胞培养、分子生物学、细胞化学等技术探讨雌激素对蒙古绵羊输卵管上皮细胞β-防御素表达的调节作用机制及其信号通路。研究结果将为今后深入探讨雌激素或其他调节因子对防御素表达的调控机制提供理论基础；特别是为人的生殖道防御素表达、生殖激素、黏膜免疫、疾病发生等的关系研究提供模型和思路；对雌激素新的功能与作用（调节黏膜免疫）的研发应用等也具有重要意义。

英文摘要

经免疫组化方法和形态学方法鉴定，证实所培养细胞具有典型的上皮细胞特征。17β-雌二醇对绵羊输卵管上皮细胞中 SBD-1 和 SBD-2 均存在着明显时间效应和剂量依赖关系，17β-雌二醇在其剂量为 10-8 M、处理细胞 6 小时后对 SBD-1 和 SBD-2 的上调幅度最大。E2诱导SBD-1基因表达在前期通过GPR30介导非基因组途径进行调控，并且这种调控是迅速高效的，但持续时间较短；而后期主要是由ERs介导的基因组途径进行调控，此种调节效果同GPR30介导的非基因组途径相比有所降低，但持续时间较长。在绵羊输卵管上皮细胞中E2诱导的SBD-1表达需要通过cAMP/PKA，PKC和 NF-κB途径，并且这三个途径需要同时被激活，才能促进SBD-1表达量的上升。成功构建了蒙古绵羊SBD-1基因的原核、真核表达载体，并在大肠杆菌中和毕赤酵母中获得表达.关键词：绵羊；17β-雌二醇；输卵管上皮细胞；SBD-1；表达

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