本研究对CRC发生发展过程中结肠组织间隙液（TIF）蛋白丰度的动态定量检测来寻找生物标志物。我们成功构建了AOM-DSS小鼠结肠癌模型，通过对该模型肿瘤不同发展时期（Cycle I、Cycle II、Cycle III）的结肠中下段TIF蛋白质组的动态定量研究，成功定量了584个TIF蛋白。我们从TIF蛋白中筛选得到144个显著差异蛋白质，并根据其丰度变化趋势将其分为持续上调（n=45）、持续下调（n=17）和非持续变化（n=82）三类。随后，我们在16只小鼠的TIF样本内以多重反应监测（MRM）技术对24个持续性丰度变化蛋白进行个体化定量检测，确证了其中18个蛋白质（持续上调蛋白12个，持续下调蛋白6个）的iTRAQ定量结果。为了检验CRC相关TIF蛋白是否具有成为CRC血清标志物的潜质，我们在该小鼠模型的血清样本中开展了针对12个持续上调蛋白的个体化MRM定量检测，结果表明：Cycle III组中LRG1、TUBB5和IGJ的丰度较Control组显著上调。随后，我们同样以MRM技术检测了16例CRC患者及16例健康人血清样本中这三个蛋白质的丰度，以初步评估其作为候选标志物在人类血清中应用的兼容性。与健康对照组相比，LRG1和TUBB5在CRC组呈现出了显著的丰度上调，而IGJ在两组中无显著差异变化。受试者工作特征曲线分析表明，LRG1、TUBB5的曲线下面积分别为0.74和0.70，且这两个指标的联合使用有助于提高检测的特异性。. 为了评估候选标志物的临床应用潜能，我们在扩大的临床血清样本中对LRG1的绝对浓度进行双抗夹心ELISA检测，发现其在CRC组较健康对照组显著上调，且当阈值为34.56 μg/mL时，血清LRG1区分健康对照和CRC的灵敏度为59.3%、特异性为79.6%，表明LRG1具有一定的CRC血清标志物应用前景。随后，我们以组织芯片免疫组化实验对比了结肠癌及其癌旁组织内LRG1的表达丰度，结果表明LRG1在结肠癌上皮细胞中显著上调，且其在两种不同的肿瘤原发灶情况（T3 vs. T1）、肿瘤远端转移与否（M1 vs. M0）及三种不同的肿瘤分期（Stage IV vs. Stage I，Stage IV vs. Stage II）内部具有显著的差异表达。