肿瘤睾丸抗原（CT抗原）在多种肿瘤中有很强的免疫原性，特别是在非小细胞肺癌中。我们对目前已知的CTA进行了序列分析和抗原性分析，挑选出82个抗原性强且能代表CT抗原家族的成员作为重组CTA的候选物，利用酵母和大肠杆菌表达系统，获得了72个CT抗原重组蛋白质和6个非CT抗原重组蛋白质。在此基础上，我们建立起CT抗原蛋白质芯片。为了保证CT抗原芯片的质量，使得不同样本之间的数据具有可比性，我们比较分析了CT抗原芯片内和芯片间的蛋白质杂交的信号CV值，发现大约80%芯片内的Human IgG和Mouse IgG的CV值分别小于9%和14%；Human IgG和Mouse IgG的CV值分别为28%和33%，也在可以接受的范围之内。同时，我们采用了proCAT的芯片归一化的方法，校正了不同样本之间的信号差异，降低了不同样本之间的系统误差。利用CT抗原芯片，我们筛选了377份血清样本。筛选结果显示，四个CT抗原（NY-ESO-1、XAGE-1、ADAM29和MAGEC1）的组合，对于检测非小细胞肺癌血清具有潜在的应用价值。这个标志物组合在训练组有33%的敏感性和96%的特异性，而在测试组中有36%的敏感性和89%的特异性。