在应激反应中新信号通路轴p38-EGR1-PTEN的研究

我们先前的研究表明，Pten基因是早期生长反应因子EGR1的一个重要生理靶子。本课题在这个重要发现的基础上，采用2D胶-肽谱、基因定点突变、LC-MS/MS质谱分析、体内代谢[32]P同位素标记、磷酸化特异性抗体制备及测定等技术对EGR1的磷酸化位点进行了体外体内鉴定，发现了多种激酶包括p38、 JNK1、 ERK1/2、 AKT1、PKC、CK1和CK2等可对EGR1磷酸化修饰。研究了在应激反应中p38激酶作用下的EGR1磷酸化的功能与分子机理，发现在S12/26和S492位点上的EGR1磷酸化修饰能有效地结合到PTEN启动子区而导致PTEN基因转录；在S444位点上的EGR1磷酸化修饰可增加其自身稳定性。另外，Akt1作用下可发生在S350及T309位点上的EGR1磷酸化修饰, 前者影响EGR1在核内的累积。在此基础上利用肿瘤移植技术，获得EGR1磷酸化位点突变的动物肿瘤模型，证实了p38激酶作用下的EGR1磷酸化的生理功能，最终阐明了在应激反应中新信号通路轴p38-EGR1-PTEN的调控机制。该项目的完成丰富了本课题组在国际上率先提出的EGR1、PTEN和p53/p73之间形成的精致的抑癌网络调控理论，为这些肿瘤抑制因子为靶标的新癌症治疗方案提供了理论基础。