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肝郁证的影像遗传学与基因调控网络研究
结题报告
批准号:
81230085
项目类别:
重点项目
资助金额:
280.0 万元
负责人:
吕志平
依托单位:
学科分类:
H31.中医学
结题年份:
2018
批准年份:
2012
项目状态:
已结题
项目参与者:
文戈、陆小兵、曲宏达、丁国安、杨琳、黄少慧、安海燕、朱晓霞
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中文摘要
肝郁证与肝主疏泄功能密切相关,疏泄失常表现为肝气逆与肝气郁。我们前期的研究发现肝郁证的发病与脑中枢有关,我们拟采用脑部BOLD-fMRI成像技术,对正常志愿者和肝郁患者进行不同脑区功能变化定位研究,以确定肝郁证的功能改变脑区。通过外显子测序和高通量HiSeq测序发现肝郁患者的易感基因,MicroRNA测序发现患者血清中相关的miRNA,电化学法和液相蛋白芯片技术发现脑脊液神经内分泌变化。然后通过猕猴和小鼠肝郁模型及关键基因敲除和过表达小鼠两类模型来验证通过患者研究得出的结论,采用BOLD-fMRI成像和脑定位仪来验证功能改变脑区,HE、尼氏染色观察脑组织形态改变,采用免疫组化、免疫印迹和PCR技术来检测易感基因的表达变化,最终找到肝郁证与影像遗传学及基因调控网络的关系。
英文摘要
Syndrome of Gan stagnation is closely related to liver's function of controlling dispersion .If it had functional disorder,the liver would performed for Liver-qi Invasion Syndrome and liver Qi stagnation. Our previous study found that gan stagnation is related to the Brain central nervous system. We will adopt BOLD-fMRI techniques to study the changes of different brain regions of normal volunteers and patients of stagnation in order to determine the location of brain area whose function changed. Through exon sequencing and high-throughput HiSeq sequencing revealed the predisposing genes of patients who have gan stagnation , Through MicroRNA sequencing found related miRNA in the patients'serum.Use electrochemical method and liquid phase protein chip technology to test CSF in order to find neuroendocrine changes. Then through the Macaque and mouse model and key gene knockout and overexpression in mice two models to verify the conclusion we study by patients, using BOLD-fMRI tecnology and cerebral localization instrument to verify the function change of brain areas.Adopt HE,Nissl staining methods to observe Histological changes of brain, using Immunohistochemistry, Western blotting and PCR technology to test expression changes of susceptibility gene .Eventually we could find out the relationship between gan stagnation and imaging genetics , gene regulatory net.
肝郁证是以情绪低落、心情抑郁为主要症状的病证,是肝病证候的核心。作为近几年的研究热点,其形成机制及证侯内涵至今尚不完全清楚。结合我们前期的研究发现肝郁证的发病与脑中枢有关,本项目是利用多组学、多层次、多平台开展的基于人、猴、鼠的肝郁证影像遗传学及基因调控网络研究。主要采用脑部BOLD-fMRI 成像技术以确定肝郁证患者及食蟹猴、啮齿类动物模型的功能改变脑区,并结合基因测序分析筛选肝郁证的易感基因,蛋白质组学分析神经内分泌及代谢产物变化,关键基因敲除小鼠深入验证。首先,我们联合多家医院招聘并筛选符合肝郁证辨证的病人及正常受试者,同时我们成功构建了2种食蟹猴肝郁模型,该模型能较好地模拟人类肝郁证状态,为本项目的研究奠定了模型基础。临床试验和食蟹猴肝郁模型脑成像分析结果,初步明确肝郁证相关脑区集中在前额叶、纹状体、枕叶及部分边缘系统(海马、扣带回)等。并初步构建了肝郁证相关miRNA-mRNA调控网络,为阐明其基因表达调控机制奠定基础。同时发现肝郁状态与色氨酸代谢(5-HT、IDO1)、炎症因子(MCP-1)、miR-378d/BDNF异常密切相关,推测MCP-1、IDO1、BDNF可能是其易感基因。最后我们应用CUMS方法成功制备了大鼠、小鼠肝郁模型,联合特异性抑制剂或基因敲除,结合以方测证方法,初步明确MCP-1、IDO1、BDNF是肝郁证的易感基因。同时阐明加味逍遥散可通过调节MCP-1、IDO1、BDNF等基因表达及其相关信号通路(如β-Arrestin2通路),改善有关脑区的异常功能活动,从而发挥治疗肝郁证的作用。本项目从多层次、多水平阐明肝郁证的发病基础及靶标基因调控机制,并为加味逍遥散治疗肝郁证提供现代分子生物作用基础,为肝郁证的本质研究提供了新的思路和途径。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behavior in Rats through Modulation of beta-Arrestin 2-Mediated Pathways in Hippocampus
逍遥散通过调节海马β-抑制蛋白2介导的通路改善大鼠抑郁样行为
DOI:--
发表时间:2014
期刊:Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine
影响因子:--
作者:Liu, Yuanliang;Diao, Jianxin;Lv, Zhiping;Sun, Xuegang
通讯作者:Sun, Xuegang
Voluntary wheel running ameliorates depression-like behaviors and brain blood oxygen level-dependent signals in chronic unpredictable mild stress mice
自愿跑轮可以改善慢性不可预测的轻度应激小鼠的抑郁样行为和脑血氧水平依赖性信号。
DOI:10.1016/j.bbr.2017.05.032
发表时间:2017-07-14
期刊:BEHAVIOURAL BRAIN RESEARCH
影响因子:2.7
作者:Huang, Peng;Dong, Zhaoyang;Lv, Zhiping
通讯作者:Lv, Zhiping
Danzhi Xiaoyao San ameliorates depressive-like behavior by shifting toward serotonin via the downregulation of hippocampal indoleamine 2,3-dioxygenase
丹栀逍遥散通过下调海马吲哚胺 2,3-双加氧酶而转向血清素,从而改善抑郁样行为
DOI:10.1016/j.jep.2014.11.031
发表时间:2015
期刊:Journal of Ethnopharmacology
影响因子:5.4
作者:Zhu Xiaoxia;Jing Linlin;Chen Chun;Shao Meng;Fan Qin;Diao Jianxin;Liu Yuanliang;Lv Zhiping;Sun Xuegang
通讯作者:Sun Xuegang
Xiao Yao San Improves Depressive-Like Behavior in Rats through Modulation of β-Arrestin 2-Mediated Pathways in Hippocampus.
逍遥散通过调节海马β-抑制蛋白2介导的通路改善大鼠抑郁样行为
DOI:10.1155/2014/902516
发表时间:2014
期刊:Evidence-based complementary and alternative medicine : eCAM
影响因子:--
作者:Zhu X;Xia O;Han W;Shao M;Jing L;Fan Q;Liu Y;Diao J;Lv Z;Sun X
通讯作者:Sun X
Paeoniflorin ameliorates interferon-alpha-induced neuroinflammation and depressive-like behaviors in mice.
芍药苷可改善干扰素α诱导的小鼠神经炎症和抑郁样行为。
DOI:10.18632/oncotarget.14160
发表时间:2017-01-31
期刊:Oncotarget
影响因子:--
作者:Li J;Huang S;Huang W;Wang W;Wen G;Gao L;Fu X;Wang M;Liang W;Kwan HY;Zhao X;Lv Z
通讯作者:Lv Z
基于肝肠轴探讨Cav-1调控铁稳态影响肝纤维化进程的分子机制及保肝宁的干预作用
  • 批准号:
    82374339
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    48万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    吕志平
  • 依托单位:
基于巨噬细胞胞葬探讨IDO1调控肝纤维化免疫微环境稳态机制及保肝宁干预作用
  • 批准号:
    82174168
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    54万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    吕志平
  • 依托单位:
基于脑功能网络及色氨酸代谢微环境分析逍遥散防治肝郁证的分子调控机制
  • 批准号:
    81873170
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    56.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    吕志平
  • 依托单位:
基于IDO调控免疫微环境探讨保肝宁防治肝纤维化的分子机制
  • 批准号:
    81673774
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    68.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    吕志平
  • 依托单位:
肝窦内皮细胞的调节机制与肝主疏泄的相关性研究
  • 批准号:
    30973699
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    32.0万元
  • 批准年份:
    2009
  • 负责人:
    吕志平
  • 依托单位:
瘦素刺激肝星状细胞增殖的信号转导机制及保肝宁干预的研究
  • 批准号:
    30672769
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    8.0万元
  • 批准年份:
    2006
  • 负责人:
    吕志平
  • 依托单位:
肝气郁结证的蛋白质组研究
  • 批准号:
    30371713
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    20.0万元
  • 批准年份:
    2003
  • 负责人:
    吕志平
  • 依托单位:
保肝宁对肝星状细胞激活过程中核转录因子的影响
  • 批准号:
    30271627
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    7.0万元
  • 批准年份:
    2002
  • 负责人:
    吕志平
  • 依托单位:
国内基金
海外基金