神经病理性疼痛相关微小RNA在中枢感觉神经传导通路中的功能研究

本项目研究计划在前期研究基础上，利用生物信息学、原位杂交、免疫组化、转基因以及基因沉默等研究方法，明确神经病理性疼痛相关miRNA 在中枢感觉神经传导通路中的定位、分布及功能，继而探讨特定miRNA 过表达或表达抑制对神经病理性疼痛及相关突触结构与信号传导通路的影响，以期发现神经病理性疼痛临床治疗的新思路。截止目前，本项目已基本完成全部预期研究内容。本项目研究发现在bCCI大鼠的脊髓背角，miR-146a、miR-341表达升高>2倍，miR-203、miR-541*及miR-181a-1*表达降低>2倍，这四种差异表达的miRNA分子在ACC和海马在naïve、sham及bCCI组之间表达差异没有明显统计学意义。miR-203在bCCI大鼠脊髓背角表达量降低>10倍，生物信息学显示rap1a是其有效靶基因，Rap1a蛋白在bCCI大鼠脊髓背角表达量显著升高，在类神经元细胞中明确了rap1a是miR-203确切的靶基因，同时在类神经元细胞中明确了miR-203可以抑制rap1a蛋白的表达。miR203过表达慢病毒载体鞘内注射有效缓解大鼠神经病理性疼痛行为学。miR-146a在bCCI大鼠脊髓背角表达量升高，生物信息学显示TLR-4信号传导通路中的个别重要分子是其靶基因，CCI大鼠脊髓背角组织TLR4 的MYD-88依赖通路处于活化状态，而且，LPS诱导小胶质细胞活化并表达TNFa与IL-6，本研究还将进一步对miR-146a对TLR-4信号传导通路活化的影响进行深入的研究。