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泛素C在辐射损伤与防护中的作用及机制研究
结题报告
批准号:
81172597
项目类别:
面上项目
资助金额:
60.0 万元
负责人:
曹建平
依托单位:
学科分类:
H29.放射医学
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
朱巍、罗加林、薛莲、李明、刘犁、冯爽、罗居东、朱财英
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中文摘要
我们在已结题的国家自然基金项目的研究中发现:青蒿素衍生物能提高P53突变型细胞的放射敏感性,而不影响P53野生型细胞的放射敏感性;引起不同细胞放射敏感性差异的原因是青蒿素衍生物不能上调P53突变型细胞泛素C的表达,但能诱导P53野生型细胞泛素C的高表达;泛素C高表达能提高细胞损伤修复能力。本项目拟选择P53突变/野生/缺失型细胞,在构建泛素C高/低表达细胞株,转染P53野生型或不同突变体的P53质粒的基础上。观察青蒿素衍生物对照射细胞泛素表达的影响;检测泛素C表达水平对细胞放射敏感性的影响;分析胞外游离泛素对细胞和动物放射敏感性的影响;寻找P53泛素化位点及P53泛素化在放射应答中的作用。旨在揭示青蒿素衍生物对P53突变/野生型细胞放射增敏差异的机理;探索P53对泛素C的调控机理;明确泛素C表达水平对细胞放射敏感性的影响机制;寻找P53泛素化位点;探讨游离泛素分子对辐射损伤与防护的作用机制
英文摘要
(一)泛素作为肺癌放射增敏靶点的研究。1.检测肺癌及癌旁组织中泛素蛋白表达。泛素蛋白在肺癌组织中的表达量明显高于癌旁组织(P<0.001)。2.成功构建并表达抑制泛素基因表达的shRNA-UBB、shRNA-UBC质粒。二者联合作用对p53缺失型H1299细胞中泛素蛋白水平抑制作用更明显(抑制率为76%)。3.泛素表达水平对肺癌细胞辐射敏感性的影响。(1)shRNA-UBB、shRNA-UBC联合作用,对人非小细胞肺癌H1299、A549细胞有增殖抑制作用,其对p53缺失型H1299细胞增殖的抑制作用较p53野生型A549细胞显著;(2)p53缺失型H1299细胞Ub-KD(shRNA-B4/C2)的放射敏感性增加,Ub-KD对p53野生型A549细胞不具有放射增敏作用。4. Ub-KD放射增敏的机理。下调泛素表达增加诱导(3、6 Gy)X射线照射后H1299细胞的G1期阻滞,降低辐射诱导H1299细胞DNA损伤修复能力,抑制NF-κB活化及转入胞核内NF-κB蛋白水平降低; 5. 泛素表达水平对裸鼠体内移植瘤放疗效果的影响。(1)Ub-KD联合照射的H1299细胞裸鼠移植瘤体积明显小于照射组(P<0.05)。(2)沉默泛素的shRNA质粒能在体内表达。.(二)游离泛素的辐射防护作用的研究。1.小鼠血清中free UB浓度随着照射剂量和照后时间的延长而增加。2.7 Gy X射线照射后1、3、7、15天恒河猴血清中free UB表达量增加(P < 0.01)。3.肿瘤病人放疗后血清中free UB的表达量明显增加。4.7 Gy X照射后,小鼠辐射敏感组织(小肠、脾脏)中free UB表达量均明显增加,而辐射不敏感组织(心、肝、肺、肾)中free UB表达量无明显变化。5.辐射提高小鼠小肠中free UB编码基因UBB mRNA表达量(72.6%),而同一小鼠心脏匀浆中free UB编码基因UBB mRNA表达量无明显变化。6.Free UB可明显提高照射后辐射抗性C57小鼠的存活率。7.Free UB可减轻小鼠骨髓的辐射损伤、对免疫系统具有辐射防护作用,同时,可加快小鼠小肠辐射损伤的恢复。8. Free UB对辐射损伤防护作用的机制。表达谱芯片结果表明,Free UB可通过多种代谢途径能对小鼠的辐射损伤起到防护作用。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Hypoxia-Inducible Factor-1 alpha Downregulation by Small Interfering RNA Inhibits Proliferation, Induces Apoptosis, and Enhances Radiosensitivity in Chemical Hypoxic Human Hepatoma SMMC-7721 Cells
小干扰 RNA 下调缺氧诱导因子 1 α 可抑制化学缺氧人肝癌 SMMC-7721 细胞的增殖、诱导细胞凋亡并增强放射敏感性
DOI:--
发表时间:2011
期刊:Cancer Biotherapy and Radiopharmaceuticals
影响因子:3.4
作者:Yang, Wei;Sun, Ting;Cao, Jianping;Fan, Saijun
通讯作者:Fan, Saijun
DOI:--
发表时间:2013
期刊:科技导报
影响因子:--
作者:曹建平
通讯作者:曹建平
OTUD5 regulates p53 stability by deubiquitinating p53.
OTUD5 通过去泛素化 p53 来调节 p53 稳定性
DOI:10.1371/journal.pone.0077682
发表时间:2013
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Luo J;Lu Z;Lu X;Chen L;Cao J;Zhang S;Ling Y;Zhou X
通讯作者:Zhou X
DOI:10.3109/09553001003668006
发表时间:2010-05
期刊:International Journal of Radiation Biology
影响因子:2.6
作者:Wei Yang;T. Sun;Jianping Cao;Fenju Liu
通讯作者:Wei Yang;T. Sun;Jianping Cao;Fenju Liu
Lentiviral DDX46 knockdown inhibits growth and induces apoptosis in human colorectal cancer cells
慢病毒 DDX46 敲低可抑制人结直肠癌细胞的生长并诱导细胞凋亡。
DOI:10.1016/j.gene.2015.02.020
发表时间:2015-04-15
期刊:GENE
影响因子:3.5
作者:Li, Ming;Ma, Yanchao;Cao, Jianping
通讯作者:Cao, Jianping
多组学联合的生物辐射敏感分子标志物研究
  • 批准号:
    U1967220
  • 项目类别:
    联合基金项目
  • 资助金额:
    267.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    曹建平
  • 依托单位:
四氢生物蝶呤及其代谢产物在放射性肺损伤进展及早期预警中的作用与机制研究
  • 批准号:
    81872552
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    曹建平
  • 依托单位:
PRDX6/Wnt3a复合物调控β-Catenin通路对辐射损伤的影响与机制研究
  • 批准号:
    81673100
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    70.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    曹建平
  • 依托单位:
游离泛素(free UB)通过CXCR4跨膜受体通路在放射损伤中的作用机制研究
  • 批准号:
    81472917
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    75.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    曹建平
  • 依托单位:
青蒿素及其衍生物作为放射治疗致敏新药的研究
  • 批准号:
    30670632
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    26.0万元
  • 批准年份:
    2006
  • 负责人:
    曹建平
  • 依托单位:
TEL1、hTOP3基因改变A-T细胞基因组不稳定性
  • 批准号:
    30170288
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    18.0万元
  • 批准年份:
    2001
  • 负责人:
    曹建平
  • 依托单位:
国内基金
海外基金