OPG/RANKL/RANK信号系统对蛋鸡髓质骨形成的调控机理研究

骨保护素 (oeteoprotegerin，OPG) 是一种能阻断RANKL与RANK结合，抑制破骨前体细胞分化、成熟破骨细胞活性并诱导其凋亡的分泌型糖蛋白。体内调节骨代谢的许多激素和细胞因子最终通过调节OPG/RANKL的表达而发挥作用。鉴于OPG在骨代谢中的重要调节作用，本项目旨在构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-chOPG；体外试验，通过脂质体介导转染鸡胚成纤维细胞，表达外源chOPG蛋白，观察OPG和RANKL蛋白对鸡胚破骨细胞功能的影响，同时利用鸡胚BMSCs细胞诱导培养成骨细胞，观察chOPG对鸡胚BMSCs诱导的成骨细胞功能的影响；体内试验，通过肌肉注射蛋鸡骨骼肌，探讨质粒pcDNA3.1(+)-chOPG在蛋鸡体内的分布、外源chOPG蛋白的表达和对主要器官组织的病理学变化，以及对蛋鸡生化指标、生产性能和骨骼代谢的影响。结论：成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(+)-chOPG，质粒转染CEFs后能够表达抑制破骨细胞生物学活性的外源chOPG蛋白，适当剂量（200 μg）的外源质粒pcDNA3.1(+)-chOPG在不影响产蛋量的情况下，可改善骨代谢，主要器官即心、肝、脾、肾、注射部位骨骼肌组织未发现明显的病理学变化，为进一步研究笼养蛋鸡骨质疏松发生机制提供新的思路。