我们前期研究证实转化生长因子-β3（TGF-β3）能有效抑制TGF-β1介导的肝纤维化，而cAMP反应序列结合蛋白-1（CREB-1）是TGF-β3信号通路中的关键调节蛋白，而CREB-1在肝纤维化中的作用尚不清楚。本项目的主要研究内容是探讨翻译后修饰的CREB-1对TGF-β1信号通路和其介导的肝纤维化的影响。在实验中，我们用pRSV-CREB-1质粒上调CREB-1表达，分别用cAMP激动剂(FSK)或组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA刺激CREB-1磷酸化和乙酰化，结果表明活化的CREB-1可以降低TGF-β1介导的I型胶原、磷酸化Smad2/Smad3、磷酸化 Erk1/2、RhoA、ROCK1的表达，并能增加Smad7的表达。因此，翻译后修饰的CREB-1不仅可以通过Smad依赖途径还可以通过Smad非依赖途径抑制TGF-β1介导的肝纤维化。在CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型中，发现肝纤维化时p-CREB-1的表达水平较对照组明显升高 (1.8-fold, P<0.01)，提示p-CREB-1可能在肝纤维化形成中发挥重要作用。此外，使用外源性重组蛋白TGF-β1处理HSC，结果显示外源性TGF-β1诱导HSC 内p-CREB-1的表达，而内源性TGF-β1 和collagen I 的mRNA和蛋白的表达也增加。在HSC内，上调或下调CREB-1的表达水平，使用外源性TGF-β1处理或不处理，结果显示在p-CREB-1表达上调的HSC内，TGF-β1 和collagen I的表达也增加，当合并TGF-β1诱导时增加更为显著。相反，在p-CREB-1表达下调的HSC内，TGF-β1 和collagen I的表达降低，外源性TGF-β1对内源性TGF-β1 和collagen I表达的诱导作用也减弱。此外，我们还通过染色质免疫共沉淀和报告基因的方法，发现p-CREB-1作为一种顺式作用元件，能够结合到TGF-β1基因启动子中的CRE位点上，启动TGF-β1基因的转录。在肝纤维化大鼠模型中，通过尾静脉注射慢病毒以上调CREB-1的表达，发现TGF-β1 和collagen I表达增多和纤维化形成。本项目深入研究了翻译后修饰的CREB-1在TGF-β1介导的肝纤维化中的重要作用和作用机制，丰富了肝纤维化发生机制和抗纤维化治疗靶点的理论研究。