鼻咽癌去甲基化细胞模型的建立及cDNA芯片技术高通量筛选鼻咽癌甲基化谱的研究

肿瘤的发生是一个多步骤多因素参与的复杂生物学过程，涉及到多基因的异常。鼻咽癌（NPC）是一种高频率的基因甲基化的肿瘤，DNA甲基化引起的抑癌基因失活，在鼻咽癌的发生发展中起着重要的作用。系统化规模化的寻找甲基化基因并建立鼻咽癌甲基化谱，对深入了解鼻咽癌的表观遗传学发病机制与及早期分子诊断技术的开发有重要意义。本研究利用siRNA敲除DNA甲基化转移酶1（DNMT1）的原理建立去甲基化NPC细胞和去甲基化正常鼻咽细胞模型，结合利用DNA甲基化转移酶抑制剂进行去甲基化处理，利用cDNA芯片高通量规模化的筛选发生甲基化调控异常的肿瘤相关基因；进一步用亚硫酸氢盐测序法和甲基化特异性PCR法检测NPC肿瘤和癌旁组织中这些基因的甲基化状态，筛选出NPC肿瘤特异性的甲基化基因，建立NPC甲基化谱；结合肿瘤样本的临床资料数据分析找出可用于NPC早期诊断和预后监测的分子标志物。同时也可能发现新的抑癌基因。