稳态S-腺苷蛋氨酸在HBx诱发肝癌细胞表观遗传修饰异常中的作用机制研究

乙肝病毒X蛋白（HBx）作为一种反式活化因子与HCC的发生、发展密切相关。肝癌发生过程中决定S-腺苷蛋氨酸(SAM)水平的甲硫氨酸腺苷转移酶(MATs)的表达由MAT1A转变成MAT2A。我们推测HBx通过调控MATs表达，影响稳态SAM浓度导致肝癌细胞表观遗传修饰异常，引起肝癌的发生、发展。为此，本课题用临床样本研究肝癌组织中HBx、稳态SAM浓度、DNMTs的相关性及意义。细胞水平分析稳态SAM在HBx影响肝癌细胞表观遗传修饰状态中的作用。并研究肝癌细胞中HBx与DNMTs相互作用所导致MAT1A、MAT2A基因表观遗传修饰的变化，期望理解HBx诱发肝癌的表观遗传机制。.我们发现，糖皮质激素（GCs）和SAM具有协同抗乙肝病毒作用。在药理浓度水平下，GCs通过刺激MAT1A表达从而诱导SAM的合成。HBV通过上调DNA甲基化转移酶-1（DNMT1）抑制MAT1A的表达。HBV通过促进MAT1A启动子甲基化水平，抑制了可被GCs诱导的MAT1A表达，其机制在于HBX过表达通过对MAT1A启动子中GRE位点特异性高甲基化而发挥作用的。IFN-α可通过抗病毒作用抑制HBV表达，进而促进MAT1A表达。GCs诱导的AdoMet合成可重塑STAT1甲基化，并非磷酸化，从而促进STAT1活化。PRMT1以AdoMet为甲基化供体对STAT1进行甲基化修饰，进而使其活化，进而增强IFN-α的抗病毒活性。GCs、AdoMet和IFN-α的联合应用，形成正向反馈环，增强IFN-α抗HBV活性。.另外，我们发现血清中ALB和PT的水平是影响CHB和HCC患者血浆中SAMe水平的独立影响因子。HCC患者血浆中SAMe水平显著高于正常人和CHB。CHB和HCC患者中C级患者SAMe浓度均显著高于A级，而与B级无显著性差异。这些提示人血浆中SAMe水平受血清ALB和PT的影响，与乙肝相关性肝病的严重程度密切相关，有希望成为一个新的非侵入性肝脏受损程度的生物指标。.最后，我们发现在早期肝癌患者（BCLC A1~A4），SAMe的外源性补充治疗并未有明显的临床疗效。而对于晚期肝癌患者（BCLC B~C），SAMe的治疗可以明显降低术后的ALT及AST水平并能明显延长肿瘤的术后复发时间，提高术后2年生存率。SAMe对于晚期乙肝肝癌患者显现出比较好的临床疗效，可能是肝功能改善的结果。