PRL-3基因启动子转录因子snail调控元件的分析和鉴定

为深入研究PRL-3基因转录调控的机制，在对人PRL-3基因启动子进行生物信息学分析的基础上，克隆了人PRL-3基因5′部分调控区并对其功能进行了初步分析，发现-642 bp～-383 bp及-699 bp～299 bp区域启动子活性较高，核染色质免疫沉淀技术结合PCR技术确定PRL-3基因启动子区域存在Snail结合位点。为了进一步确定Snail对PRL-3转录调控的效应和机制，我们拟构建含有潜在Snail结合位点PRL-3不同长度启动子截短片段或突变型的报告载体系统，分析其活性变化；应用凝胶阻滞实验和染色质免疫沉淀技术对Snail调控元件进行鉴定；同时采用基因转染或RNA干扰技术（RNAi）技术，分析Snail的上调或调低对PRL-3基因启动子活性、PRL-3基因表达及肿瘤细胞生物学特性的影响。研究将阐明Snail参与调控PRL-3基因表达的机制。