牛血清白蛋白-槲皮素纳米颗粒在肠细胞的摄入方式及机理探讨

槲皮素(Quercetin, QUE)存在于许多水果和蔬菜中。它具有较强的抗氧化性，在心血管疾病、炎症、癌症等病变模型上显示出良好的预防和治疗作用。槲皮素在接近胃肠pH条件下容易被氧化，其稳定性较差。本研究通过牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)与槲皮素的相互作用制备BSA-QUE纳米颗粒，研究BSA-QUE纳米颗粒表观特性和形成机理；研究BSA纳米颗粒在模拟胃肠道条件下对QUE的稳定性作用和机理；研究对BSA纳米颗粒对QUE在肠上皮细胞的摄入和吸收模式的改变和机理。.QUE对BSA有较强的荧光淬灭作用，且为静态与动态并存的复合猝灭方式，相互作用力为疏水作用力和氢键，BSA的酪氨酸和色氨酸残基同时参与与QUE的相互作用，且QUE均结合在BSA的亚结构域IIA即Site I处。BSA和QUE相互作用形成粒径约为10 nm和大于100 nm的颗粒，随着pH的增大，粒径大于100 nm的颗粒所占比例逐渐减小。在PBS (pH7.4)中，BSA-QUE纳米颗粒的大小分别为42.53 nm；电势分别为25.64 mV。与BSA相互作用后的QUE的自由基清除率均小于QUE，由于QUE分子上的羟基-参与和BSA的相互作用，导致其抗氧化活性的屏蔽。在不同pH溶液中，与BSA相互作用后的QUE的自由基清除率均小于QUE，但在pH8.0溶液中，减小程度最小。.BSA-QUE纳米颗粒对Caco-2细胞生长有一定影响。随着QUE和BSA-QUE浓度的升高和作用时间的延长，Caco-2细胞存活率逐渐减小，乳酸脱氢酶释放率逐渐增加。BSA-QUE使G1期细胞增加，G2期和S期细胞减少；早期和晚期凋亡的细胞逐渐增加。.BSA-QUE纳米颗粒可被Caco-2细胞摄入。激光共聚焦显微镜观察到，FITC标记的BSA-QUE纳米颗粒进入Caco-2细胞，并随着时间的延长，细胞核区域荧光强度增强。QUE和BSA-QUE均可透过Caco-2单层细胞。BSA-QUE中QUE透过量随着时间的延长持续增大。和QUE相比，BSA-QUE中QUE透过量大于单独QUE。. 这项研究对于BSA和生物小分子相互作用的机理、纳米颗粒的表征以及细胞摄入吸收提供理论依据，对于BSA作为纳米载体促进QUE等小分子的溶解性、稳定性和吸收提供新的途径。