双歧杆菌抑制单核增生李斯特菌粘附肠上皮细胞的分子作用机制研究

益生菌在与致病菌的竞争黏附中具有一定的优势，然而鲜见两者分子作用机制的研究。本研究选择长双歧杆菌和单核增生李斯特菌分别作为益生菌和条件致病菌的代表，以肠上皮细胞为模型，从转录水平和蛋白水平上，验证了长双歧杆菌的粘附蛋白能显著上调表达，而单核增生李斯特菌的粘附入侵和毒力相关蛋白的表达量显著下调。这个结果反映和解释了双歧杆菌在肠道与单核增生李斯特菌竞争过程中占据优势的原因。本研究改进了启动子陷阱技术，成功地从长双歧杆菌和单核增生李斯特菌相互作用后，筛选出23个差异基因。此外，本研究在完成原定计划的基础上，对两歧双歧杆菌和单核增生李斯特菌的相互作用进行了iTRAQ蛋白组学测序，获得53个上调表达蛋白，63个下调表达蛋白。检验证明单核增生李斯特菌和双歧杆菌相互作用后，不仅能够促进生长，还能提高抗氧化胁迫，这也许是条件致病菌存在于健康人胃肠道中的生物学意义之一。另外，我们还分别检测了双歧杆菌粘附蛋白对单核增生李斯特菌和肠道的影响，包括免疫调控等。这些研究将有助于更全面了解益生菌和条件致病菌在肠道环境中的基因调控网络，另一方面将为发现新的功能基因和功能蛋白，建立原创性的科学研究方法和实验模式提供有益的借鉴。