背景：系统性硬皮病（systemic sclerosis，SSc）是一种自身免疫性结缔组织疾病，以自身抗体产生、皮肤及多系统器官进行性纤维化、微血管病变为主要特征，发病率具有明显性别差异，80%以上患者为女性，其发病机制目前尚未完全清楚。有研究发现CD40配体（CD40L）在SSc病人和硬皮病模型小鼠中过度表达，但CD40L在SSc中表达增高的机制尚不清楚。我课题组之前研究发现DNA甲基化抑制剂可激活正常女性原失活的X染色体，导致CD40L过度表达。因此，本课题通过比较男女SSc患者CD40L表达水平和其调控序列DNA甲基化状态，试图探讨SSc患者CD40L增高的原因，为该病发病机制的研究提供新的思路。.研究内容：密度梯度离心法分离26例SSc患者(女16例，男10例)和25例健康对照者（女15例，男10例）的外周血单个核细胞，流式细胞术检测CD4+T细胞中CD40L的表达水平；磁珠分选CD4+T细胞，实时定量聚合酶链反应（real-time RT-PCR）检测CD40L的mRNA表达水平；亚硫酸氢钠测序检测CD4+T细胞中CD40L基因调节序列的甲基化状态。与女性正常对照组相比，女性SSc患者CD4+T细胞中CD40L mRNA的表达水平显著升高（P<0.05）,CD40L的蛋白表达水平亦显著升高（P<0.05）；亚硫酸氢钠测序结果显示正常女性CD40L基因调控序列一半呈甲基化，一半呈去甲基化，而正常男性CD40L相同序列大部分呈去甲基化，女性SSc患者CD40L基因启动子和增强子区域平均甲基化水平均显著低于女性正常对照（P<0.001；P<0.001）,并且女性SSc患者CD40L启动子和增强子区域平均甲基化水平与其CD40LmRNA表达水平呈显著负相关（r = -0.629, P < 0.01；r = -0.727, p < 0.01）；男性SSc患者组与男性正常对照组CD40L mRNA和蛋白表达水平均无显著差异（P>0.05； P>0.05），并且两组CD40L基因启动子和增强子区域甲基化程度均较低，其平均甲基化水平无显著性差异（p>0.05；p>0.05）。.结果：女性SSc患者CD4+T细胞中CD40L表达显著增高，而男性患者无明显改变；女性SSc患者CD40L基因调控序列低甲基化使原失活的X染色体活化，其上的CD40L基因功能活化，从而导致CD4