人工组织工程化神经的体外构建及其修复大鼠坐骨神经缺损的研究

批准号:
81000678
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
汤欣
依托单位:
学科分类:
H2810.组织器官再生机制与调控
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
吕广明、吴坚、赵亚红、张占虎
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中文摘要
临床上治疗周围神经缺损是一大难题,人工组织神经是当今该领域研究热点之一。本研究采用丝素人工神经移植物体外构建周围组织工程化神经,通过免疫组化染色NF, S100;扫描透射电镜观察丝管内超微结构和髓鞘形成;荧光显微镜观察神经突起生长速度;电生理学测定复合动作电位等检测其构建。并用于修复大鼠坐骨神经10mm缺损,免疫组化染色NF, S100观察再生神经干生长;神经三色染色观察轴突髓鞘;透射电镜观察轴突构成数量直径分布和髓鞘厚度;RT- PCR和Western blot检测NF、GAP-43和P75mRNA和蛋白表达;胆碱酯酶染色观察神经末稍运动终板;测量并计算靶肌湿重比;再生神经动作电位、神经传导速度、复合肌动作电位和诱发肌电图;足迹试验,坐骨神经功能指数,感觉功能测定等行为学实验,各方面评价构建的人工组织工程化神经。并探讨雪旺氏细胞髓鞘形成可能的信号通路,为周围神经缺损修复提供新的有效方法。
英文摘要
寻找自体神经替代物修复周围神经缺损,一直是周围神经再生的研究热点。为了构建理想的组织工程化神经移植物,更好地模拟体内再生微环境,本研究将施万细胞、背根神经节(DRG)与丝素蛋白神经移植物共培养,体外构建组织工程化神经。免疫细胞化学染色,扫描电镜和透射电镜观察结果显示,施万细胞、DRG与丝素蛋白神经移植物共培养2周后,施万细胞与DRG发出的神经突起沿着丝素纤维,呈条带状纵向平行生长,共培养4周后有类似基质样结构形成。并且施万细胞、DRG与丝素蛋白神经移植物共培养3周后,观察到髓鞘形成。进一步将构建的组织工程化神经用于修复大鼠坐骨神经10mm缺损。术后12周,坐骨神经功能指数(SFI),电生理仪记录的大鼠坐骨神经干复合肌动作电位(CMAP)和神经传导速度(MCV),再生神经髓鞘厚度和髓鞘板层数,靶肌横截肌纤维面积和单位面积胶原纤维的百分数等动物实验结果均提示,人工组织工程化神经组(nTENG)与阳性对照的自体神经组(Autograft)相比没有显著差异,均明显优于丝素导管组(Scaffold)。术后4周,人工组织工程化神经组(nTENG)的再生神经干中,细胞粘附分子N-cadherin和周围髓鞘蛋白22(PMP22)的表达水平就显著高于丝素导管组;并且再生神经髓鞘厚度和髓鞘板层数,人工组织工程化神经组(nTENG)显著优于丝素导管组(Scaffold),与自体神经组(Autograft)相比没有显著差异。本研究成功构建人工组织工程化神经,使其成为具有神经生物学特性的神经类似物,并且用于修复大鼠坐骨神经10mm缺损,功能恢复良好。同时我们还发现再生的时间窗口是决定最终再生结果的关键,这一发现为后续进一步深入研究周围神经损伤修复提供了新的线索。
期刊论文列表
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Signaling pathways regulating dose-dependent dual effects of TNF-alpha on primary cultured Schwann cells
信号通路调节 TNF-α 对原代培养雪旺细胞的剂量依赖性双重效应
DOI:--
发表时间:2013
期刊:Mol Cell Biochem
影响因子:--
作者:Wang yongjun;Zhou songlin;Qian tianmei;Gu xiaosong
通讯作者:Gu xiaosong
DOI:10.1016/j.biomaterials.2012.02.008
发表时间:2012-05
期刊:Biomaterials
影响因子:14
作者:Xin Tang;Chengbin Xue;Yaxian Wang;F. Ding;Yumin Yang;X. Gu
通讯作者:Xin Tang;Chengbin Xue;Yaxian Wang;F. Ding;Yumin Yang;X. Gu
Gene network revealed involvements of Birc2, Birc3 and Tnfrsf1a in anti-apoptosis of injured peripheral nerves.
基因网络揭示 Birc2、Birc3 和 Tnfrsf1a 参与损伤周围神经的抗凋亡
DOI:10.1371/journal.pone.0043436
发表时间:2012
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Wang Y;Tang X;Yu B;Gu Y;Yuan Y;Yao D;Ding F;Gu X
通讯作者:Gu X
构建工程化外泌体应用于调控周围神经损伤后运动感觉功能恢复
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:52万元
- 批准年份:2022
- 负责人:汤欣
- 依托单位:
差异调控组织工程化神经对周围神经再生运动感觉功能恢复的不同影响
- 批准号:81971761
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:汤欣
- 依托单位:
MicroRNA-17-92 cluster 缓释微球组织工程化神经移植物的构建及其应用于修复大鼠周围神经缺损的研究
- 批准号:81771999
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:汤欣
- 依托单位:
含TNF-α抑制剂缓释系统神经移植物的制备及其修复大鼠坐骨神经10mm缺损的研究
- 批准号:81370043
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:70.0万元
- 批准年份:2013
- 负责人:汤欣
- 依托单位:
国内基金
海外基金
