内质网在分泌蛋白和膜蛋白的折叠、装配、分泌中起着至关重要的作用，内质网功能的紊乱可导致错误折叠或未折叠蛋白的聚集，并由此引发内质网应激。为应对增加的内质网应激，未折叠蛋白反应 （UPR）或内质网应激反应将被启动。未折叠蛋白反应由3个内质网应激感受器肌醇酶1、RNA激活蛋白激酶的内质网类似激酶和激活作用转录因子介导。葡萄糖调节蛋白78（GRP78）是未折叠蛋白反应的主要调节者。在非应激的情况下，GRP78与3个内质网应激感受器结合，并使之处于失活状态。内质网应激导致GRP78与错误折叠蛋白或未折叠蛋白结合，分离GRP78与3个内质网应激感受器的结合，从而激活未折叠蛋白反应。迄今为止，GRP78与内质网应激感受器分离的机制尚不清楚。本课题的目的是探讨参与调控GRP78与内质网应激感受器分离的信号通路，并阐明其在内质网应激诱导的胰岛素抵抗中的作用。db/db 小鼠的脂肪组织和培养的3T3-L1脂肪细胞被用于本研究，培养的3T3-L1脂肪细胞经游离脂肪酸处理诱导内质网应激和胰岛素抵抗，western blot和免疫沉淀被用于检测蛋白表达、蛋白磷酸化、以及蛋白间的相互结合，携带目标蛋白cDNA和shRNA的重组腺病毒被用于过度表达或沉默目标蛋白。结果表明，游离脂肪酸可增强脂肪细胞PKCδ的磷酸化、PP2A的活性、内质网应激感受器的磷酸化、以及CHOP的表达，同时增加GRP78的去磷酸化。敲出PKCδ和PP2Ac α亚基可增加GRP78的磷酸化，并降低内质网应激感受器的磷酸化和CHOP的表达。结果同时发现，敲出PKCδ可降低PP2A活性。此外，游离脂肪酸诱导的脂肪细胞的胰岛素抵抗可被PKCδ和PP2Ac α亚基的基因沉没所逆转。结果表明，①UPR反应在游离脂肪酸诱导的脂肪细胞胰岛素抵抗中具有重要作用；②PKCδ/PP2A/GRP78信号通路参与了游离脂肪酸诱导的UPR反应；③GRP78的去磷酸化是启动UPR反应的关键环节。本研究的结果为阐明UPR反应的启动机制提供了新的理论解释，为胰岛素的抵抗提供了新的可能的靶点。