肝细胞间质变：肝纤维化病变中新机制及其阻断措施的研究

已有研究表明，上皮细胞间质变(EMT）在肾、肺等组织纤维化中具有重要意义，且TGF-beta1在引发这些组织发生EMT的过程中起着至关重要的作用。而TGF-beta1正是目前已知最强烈的肝纤维化促进因子之一，由其所致的病理生理作用贯穿于肝纤维化的全程。在此过程中，作为上皮细胞的肝细胞也发生了EMT？其机制和意义如何？这些正是本项目研究的目的。. 通过体外的研究发现，原代小鼠肝细胞于3ng/ml TGF-beta1（在不同的上皮系统中诱导EMT的最适宜刺激量中）孵育48h，E-cadherin表达逐渐减少，白蛋白阳性细胞全部表达FSP1。TGF- beta1孵育96h后，白蛋白染色消失，细胞全部呈梭形、且FSP1阳性，典型EMT来源的成纤维细胞。细胞暴露于TGF- beta1获得FSP1表达。这些发现提示TGF- beta1孵育48h后出现中间型细胞（肝细胞和成纤维细胞标记均为阳性），而96h后发生较完全的EMT。而原代肝细胞经TGF- beta1诱导发生EMT之后，其移行能力明显增强，获得类似成纤维细胞的功能。. 运用CCl4注射法诱导小鼠肝纤维化活体模型，随着肝纤维化的发生、发展，有一部分肝细胞转变成成纤维细胞，肝脏中成纤维细胞的数量也逐渐增多。在晚期肝纤维化中（CCl4注射6周后），17%的细胞为FSP1阳性，其中有28%同时为白蛋白阳性，表明其为肝细胞来源。BMP-7可阻断 TGF- beta1 诱导的 EMT，肝细胞表型标志：E-cad，Albumin mRNA 及蛋白表达明显增高；肝脏间质细胞表型标志：alpha-SMA，FSP-1，N-cad，VM，Collagen I，FN mRNA 及蛋白表达明显减低。维持肝细胞正常表型，增强肝细胞功能。BMP-7 可调节小鼠的肝细胞内 Snail 通路中 Snail1，Snail2，Smad3，Wnt 蛋白表达，可能通过抑制 TGF-β1/ Smads 通路，直接或间接抑制 Snail 通路，进而抑制 EMT。. 结论：肝纤维化有一部分肝细胞发生EMT，肝细胞的间质变可能是纤维化时肝脏中成纤维细胞的重要来源，促进了肝纤维化的发展；BMP-7可阻断 TGF- beta1 诱导的 EMT，抑制肝纤维化的形成和发展。