里氏木霉纤维素酶基因差异表达谱的解析及关键基因的功能分析

丝状真菌里氏木霉（Trichoderma reesei）极强的纤维素酶合成、分泌能力，已成为研究纤维素酶合成代谢调控的最重要模式系统之一，但目前对该机制知之甚少。本研究拟改变以往纤维素酶表达调控研究只局限于一个或少数基因基础上的策略，从基因表达的整体水平出发，采用cDNA-AFLP技术，绘制里氏木霉在各种纤维素酶诱导因子和抑制因子存在条件下全基因组范围的基因表达谱信息。结合样本性质，分析基因表达谱的差异表现特征，通过反向NorthernR技术，鉴定差异表达基因。采用生物信息学方法分析确定与纤维素酶合成代谢相关的新的关键基因，进一步通过荧光定量PCR、足迹分析、酵母双杂交、基因敲除等技术对关键基因进行功能分析，探索它们的调控机制。该研究，一方面对阐明纤维素酶合成代谢调控的分子机制具有重要意义，同时为实施代谢工程、培育纤维素酶高产菌株提供新的合理靶点。