人血清白蛋白融合单链抗体的稳定性及对重症肌无力的治疗作用

从我们已构建的重组噬粒pHEN2中扩增单链抗体（ScFv）基因，从重组质粒pUC18 中扩增人的血清白蛋白（HSA）基因，将二者克隆至载体pPIC9K构建HSA融合ScFv基因。将这一基因导入毕赤酵母GS115株表达。表达产物经纯化后，用SDS-PAGE和免疫印迹测定其一般特性，用放射免疫（RIA）、ELISA和免疫荧光测定其与可溶性人乙酰胆碱受体(AChR)、人肌肉冰冻切片AChR结合特异性，用RIA测定其在体内、外血中的稳定性，用RIA或ELISA测定其抑制致病性抗AChR抗体以及重症肌无力(MG)患者血清与人AChR结合率。制备出的HSA融合ScFv应既能保持原有的ScFv与人AChR结合活性，又能具有与HSA同样长的半寿期，使ScFv用于临床治疗MG又前进一步。这是国内首次HSA融合的ScFv的研究，也是世界上首例HSA融合抗AChR ScFv的研究。