茵陈蒿汤及其变方调控慢性肝损伤效应的机理研究

实验部分观察了茵陈蒿汤及其变方对刀豆蛋白(ConA)诱导小鼠慢性免疫性肝损伤的保护作用。选用BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、茵陈蒿汤组、茵陈蒿汤加丹参组、茵陈蒿汤加黄芪组、荣肝合剂组、荣肝小方组。正常组小鼠尾静脉注射PBS溶液0.3 mL，其他各组按ConA 6μg/gwt尾静脉注射造模，每周1次，连续8周，制备慢性肝损伤模型。造模成功后，模型组和正常组以等体积蒸馏水灌胃，各治疗组灌胃给药，每日1次，连续4周，末次药后24 h，免疫组化法检测肝组织NF-κB活性，检测血清中IP-10、CXCR-3、TNF-α活性；肝组织光镜下观察其病理变化；比较各组脾细胞增殖活性；利用全基因组芯片对各组差异表达基因进行分析。结果　①血清学变化：与模型组比较，各用药组均可以降低血清IP-10、CXCR-3、TNF-a的水平，茵陈蒿汤变方各组和茵陈蒿汤组无统计学差异(P>0•05)。②病理组织学变化：与模型组比较，中药组均能有效减轻肝细胞坏死、减少变性、减轻炎细胞浸润以及减轻肝纤维化，茵陈蒿汤加丹参组，荣肝合剂组、小方组肝组织纤维增生程度较小。③中药组均能减小肝组织NF-κB活性。④脾淋巴细胞增殖：与模型组相比，茵陈蒿汤加黄芪组、荣肝合剂组和小方组OD值均可见较大幅度升高，而茵陈蒿汤组、茵陈蒿汤加丹参组与模型组相比则无统计学差异。⑤ConA组与正常组相比，有932条基因表达量明显下调, 1730条基因表达量明显上调。表达变化的基因主要涉及免疫反应，脂代谢、糖代谢与细胞色素P450、应激与炎症凋亡、细胞周期调控、信号传导以及再生等相关功能，与ConA所致肝损伤机制相吻合；茵陈蒿汤组与模型组相比，能够改善肝脏物质与能量代谢，调节免疫紊乱状态，茵陈蒿汤加丹参组，能显著下调与肝细胞免疫相关（MHC2类分子、B细胞分化调控、、外源性多糖抗原表达）、脂代谢（甘油三酯脂蛋白颗粒、极低密度脂蛋白颗粒）基因。茵陈蒿汤加黄芪组在改善细胞周期调控，降低胶原合成，血小板活化，离子通道的异常开放，提高自由基清除能力，蛋白泛素化，葡萄糖醛酸酸活性方面优势显著。荣肝合剂组上调和下调基因涵盖了茵陈蒿汤组、茵陈蒿汤加丹参组、茵陈蒿汤加黄芪组大部分功能基因，能够有效改善肝脏免疫紊乱状态；增强解毒能力；促进损伤细胞膜的修复，抑制细胞内酶的大量释放；此外，还具有减小白细胞附着，改善细胞骨架功能；促进细胞外基质降解，减