钙网织蛋白(CRT)是一种普遍存在于各种生物体内质网中的蛋白，并且被发现可以在一些细胞的细胞膜表面表达。它在细胞内维持Ca2+稳定、蛋白质合成等方面发挥重要作用。关于CRT外翻的机制，尤其是在启动细胞凋亡、外翻早于磷脂酰丝氨酸(PS)方面，是一个重要的领域。然而，CRT外翻于人黑素细胞表面及其在白癜风患者外周血中的表达水平，还未有报道。本项目对人永生化黑素细胞系PIG1和白癜风患者永生化外周黑素细胞系PIG3V进行研究。将两类细胞分别暴露于不同浓度的H2O2，并刺激不同的时间。通过过表达及CRT siRNA转染入细胞后，检测凋亡的水平；运用RT-PCR和western blot 来检测总的CRT蛋白的表达水平；用流式细胞仪及免疫荧光来观察分析细胞表面蛋白的表达水平。功能学方面，收集了25例白癜风患者及正常人的全血，用ELISA法对CRT抗原水平进行了检测；将CRT分别与患者及正常人的PBMC共孵育后，ELISA法检测炎症因子IL-6及TNF-α。同时，对进展期和稳定期患者的CRT水平进行对比，将CRT与皮损面积做相关性分析。我们发现随着细胞凋亡水平的升高，两类细胞中表面的CRT都随着时间的延长而逐渐升高，即从胞浆转至胞膜。同时，过表达能够增强黑素细胞的凋亡，抑制CRT表达后结果与其相反；另外，检测了白癜风患者和正常对照的血浆后发现，血浆中CRT抗原的水平是白癜风患者高于正常人(p<0.05)；同时，与CRT抗原共孵育组的IL-6及TNF-α均高于未加CRT组(p<0.05)；进展期患者血浆中的CRT水平高于稳定期，同时CRT与患者外周皮损面积呈正相关。以上结果证实了H2O2诱导的氧化应激条件下，黑素细胞中的CRT可以翻转至细胞膜表面，从而可能发挥着“eat me”信号作用，诱导黑素细胞发生免疫原性凋亡，引起后续的免疫应答反应,从而进一步对机体的黑素细胞产生攻击。因此，研究CRT在氧化应激中的作用，即CRT的外翻诱导黑素细胞发生免疫原性的凋亡，而阻断CRT的外翻可能为白癜风的发病机理及治疗方向提供了新的思路。