差异性细胞捕获及遗传标记联合检测对混合精液的个人识别研究

批准号:
81373244
项目类别:
面上项目
资助金额:
70.0 万元
负责人:
王保捷
依托单位:
学科分类:
H2502.法医物证学及法医人类学
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
张璐、王春红、邢佳鑫、宣金锋、姚军、李春梅、郑瑜
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中文摘要
在轮奸案中获得的检材为2人及数人男性的精液混合物,Y-STR的检测可能做出排出的结论。单个精子因其为单倍体,不能提供全部遗传信息。本研究针对2人混合精液样品,联合检测Y、X、常染色体STR及用SSCP技术分离检测mtDNA高变区。可能分别检测出高、低拷贝者的Y、X、mtDNA高变区及部分常染色体STR型别,达到同一认定目的;无拷贝量差时,通过比对可排除或锁定嫌疑人。针对2人或多人混合精液样品,①捕获单个精子,检测mtDNA高变区序列,集合同型的精子进行常染色体STR分型。②应用荧光标记的抗A、B及H抗体,以免疫荧光组化技术捕获同型精子,进行常染色体STR分型。③根据精子表面多态性抗原的个体差别(ABO、HLA及筛选其他抗原),探讨应用流式细胞技术分离不同个体精子的方法。最终为轮奸案的侦破提供可靠证据。
英文摘要
Y-STR detection may make excluded conclusion when the samples obtained in the gang rape are two or several male semen mixture. As a haploid, the single sperm can't provide all the genetic information. In two mixed semen, this study can detect STR loci of Y chromosome, X chromosome and autosomes together and mtDNA hypervariable region after separation by SSCP techniques. If the content of the two samples is different, we can reach the same identified purpose by the detection of Y chromosomal loci, X chromosomal loci, mtDNA hypervariable region and parts of autosomal STR loci. The suspects can be ruled out or locked by comparison when the content is not significantly different. For the mixed semen of two or more samples: ①capture a single sperm, detect mtDNA hypervariable region, collect the same type of sperm and genotype autosomal STR loci. ②apply the fluorescent-labeled anti-A, anti-B and anti-H antibody to capture the same type of sperm by immunofluorescence staining technology, genotype autosomal STR loci. ③According to the individual differences of the polymorphic antigens of the sperm surface, explore the application of flow cytometry to separate the different individual sperm. Ultimately, our study can provide reliable evidence for the detection of gang rape cases.
应用SSCP法分离两男性混合精液样品的mtDNA高变区Ⅰ与Ⅱ序列,并进行序列分析。研究结果表明,混合精液样品比例超过1:10时可以确定高拷贝者的全部四类遗传标记系统的型别;比例接近时,可完全获得两个嫌疑人全部常染色体与Y、X染色体STR及mtDNA高变区Ⅰ与Ⅱ的分型。在不能排除嫌疑人的情况下,极大的提高了同一认定的机率。制作两男性混合精液样品涂片,应用单细胞捕获技术,成功地对混合样品中单精子细胞的mtDNA 高变区Ⅰ和Ⅱ进行PCR扩增并行序列分析,根据mtDNA 序列分析的结果,分别富集具有相同序列的精子细胞DNA,在最少16个精子细胞的情况下成功地进行了常染色体STR的分型检测。可以解决在嫌疑人mtDNA 高变区DNA序列不同的前提下,实现了对混合精液样品不同个体的同一认定难题。理论上,在具有足够量精子细胞的前提下,应用本技术可以解决多人轮奸案中犯罪嫌疑人的同一认定难题。
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Investigation of control region sequences of mtDNA in a Chinese Maonan population
中国毛南族人群线粒体DNA控制区序列的调查
DOI:10.3109/19401736.2015.1122776
发表时间:2017-05
期刊:MITOCHONDRIAL DNA PART A
影响因子:--
作者:Meng Jing-Hua;Yao Jun;Xing Jia-Xin;Xuan Jin-Feng;Wang Bao-Jie;Ding Mei
通讯作者:Ding Mei
Characterization of mitochondrial DNA polymorphisms in the Han population in Liaoning Province, Northeast China
辽宁省汉族人群线粒体DNA多态性特征
DOI:10.1080/24701394.2016.1275597
发表时间:2018-02
期刊:Mitochondrial DNA Part A
影响因子:--
作者:Feng-Ling Xu;Jun Yao;Mei Ding;Zhang-sen Shi;Xue Wu;Jing-jing Zhang;Bao-jie Wang
通讯作者:Bao-jie Wang
Investigation of mtDNA control region sequences in a Tibetan population sample from China
中国藏族人群样本中 mtDNA 控制区序列的调查
DOI:10.3109/19401736.2014.982629
发表时间:2014-11
期刊:MITOCHONDRIAL DNA
影响因子:--
作者:Wang Yun-ke;Yao Jun;Han Xuan;Ding Mei;Pang Hao;Wang Bao-jie;Zhang Zhi-qiang
通讯作者:Zhang Zhi-qiang
Mitochondrial DNA control region sequences may differentiate Yanbian Koreans in China from other Asian populations
线粒体DNA控制区序列可能将中国延边朝鲜族与其他亚洲人群区分开来
DOI:10.1080/03014460.2017.1288760
发表时间:2017-02
期刊:ANNALS OF HUMAN BIOLOGY
影响因子:1.7
作者:Li Xiao-na;Zheng Ji-long;Yao Jun;Dong Yue;Shi Zhang-sen;Wang Bao-jie
通讯作者:Wang Bao-jie
Mitochondrial DNA typing of laser-captured single sperm cells to differentiate individuals in a mixed semen stain
对激光捕获的单个精子细胞进行线粒体 DNA 分型,以区分混合精液染色中的个体
DOI:10.1002/elps.201600009
发表时间:2016
期刊:Electrophoresis
影响因子:2.9
作者:张璐;丁梅;庞灏;邢佳鑫;宣金锋;王春红;林子清;韩松;梁克伟;李春梅;姚军;王保捷
通讯作者:王保捷
STR基因座侧翼序列SNP在混合斑个人识别检验中的意义
- 批准号:81671872
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:58.0万元
- 批准年份:2016
- 负责人:王保捷
- 依托单位:
基于padlock probes对高度降解DNA检材进行法医学个体识别的研究
- 批准号:30772460
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:25.0万元
- 批准年份:2007
- 负责人:王保捷
- 依托单位:
国内基金
海外基金
