一种新型肝癌靶向基因治疗系统的建立及其鉴定

利用PCR技术从肝癌细胞系HepG2的基因组DNA中扩增血管内皮生长因子（vascular epithelium growth factor，VEGF）基因的启动子，通过基因重组用其替换逆转录病毒载体中的CMV启动子，构建成缺氧调控的逆转录病毒载体，验证新构建的逆转录病毒载体在缺氧条件下启动表达外源基因的活性；将鼠α1，3 半乳糖基转移酶基因插入缺氧调控的逆转录病毒载体中，转染包装细胞，包装出重组缺陷型逆转录病毒。将含有α1，3 半乳糖基转移酶基因的缺氧诱导调控重组缺陷型逆转录病毒转染肝癌细胞系HepG2。转染细胞经缺氧诱导后，通过RT-PCR检测α1，3 半乳糖基转移酶基因在该细胞中的表达情况，用标记有荧光素的凝集素IB4检测转染细胞表面α1，3 Gal表位情况。然后，检测肝癌患者血清中天然抗体、外周血NK细胞及γδT细胞对转染细胞的杀伤效应。为肝癌的基因治疗提供新的思路和方法。