课题基金基金详情
茭白黑粉菌菌丝形态发生相关基因的克隆及功能分析
结题报告
批准号:
31000357
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
叶子弘
依托单位:
学科分类:
C0509.生物学过程与代谢
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
崔海峰、申屠旭萍、刘光富、尤文雨、赵煦泓、安欣欣
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中文摘要
茭白是我国第二大水生蔬菜,其内生真菌-茭白黑粉菌的菌丝形态是决定茭白茎部膨大、保证茭白商品性的关键。但迄今为止,茭白黑粉菌菌丝形态发生的相关基因和分子机制仍不清楚。本课题组首次分离得到菌丝形态茭白黑粉菌,并通过与酵母形态茭白黑粉菌的双向电泳图谱比较和质谱分析发现与菌丝形态发生相关的MAP激酶激酶在两种形态黑粉菌间差异表达。本项目拟以菌丝型和酵母型茭白黑粉菌为实验材料,构建抑制消减杂交文库,克隆茭白黑粉菌MAPK途径相关基因。通过荧光定量PCR、生物分子相互作用分析技术和遗传转化技术,研究茭白黑粉菌MAPK途径相关基因的表达模式、MAPK途径各相关蛋白间的相互作用及该途径上游信号分子和下游应答因子,并通过转基因进行功能验证,以明确茭白黑粉菌MAPK途径相关基因的功能,分析茭白黑粉菌菌丝形态发生的分子机制,为进一步探讨茭白的孕茭机理和灰茭形成机制奠定基础。
英文摘要
茭白是我国第二大水生蔬菜,其内生真菌-茭白黑粉菌的菌丝形态是决定茭白茎部膨大、保证茭白商品学的关键。但迄今为止,茭白黑粉菌菌丝形态发生的相关基因和分子机制仍不清楚。本课题组首次分离得到菌丝形态茭白黑粉菌,进行了菌丝型茭白黑粉菌的基因组测序和菌丝型、酵母型黑粉菌不同发育时期的表达谱分析,通过分析发现与菌丝形态发生相关的MAPK途径关键基因UeERK、UeMKK、UeSSK及PKA途径关键基因UePKA在两种形态黑粉菌间差异表达。课题组围绕茭白黑粉菌菌丝形态发生相关的可能机制,展开了以下几方面的工作:1、完成茭白黑粉菌的分离和培养,进行了影响茭白黑粉菌菌丝形态发生的培养条件分析。结果表明,萨氏培养基、28℃利于茭白黑粉菌菌丝形态的发生,以乳糖、半乳糖、山梨醇、葡萄糖、甘露醇、蔗糖为唯一碳源的培养基可诱导酵母型黑粉菌向菌丝型转换,而在麦芽糖为唯一碳源的培养基上茭白黑粉菌无法形成菌丝。2、克隆了UeERK、UeMKK、UeSSK及UePKA的基因全长,长度分别为1828、2204、7148、1949bp,经Blast比对,与相应基因的相似度在78%-90%之间,各基因均具有丝/苏氨酸双特异性蛋白激酶催化域、蛋白激酶ATP结合位点、丝/苏氨酸蛋白激酶活化位点。UeERK、UeMKK、UeSSK分属于MAPK途径的MAPKKK、MAPKK和MAPK。3、完成了四个基因的荧光定量PCR条件优化,在分别以麦芽糖、蔗糖为唯一碳源的培养基中培养4、8、12、16天的定量PCR分析结果表明,各基因的表达量差异表现出较为一致的趋势,且在蔗糖为唯一碳源的培养基上培养四天时出现最大表达量。4、完成了各基因的原核表达及互作分析。结果显示各基因之间不存在显著的互作关系。5、构建了遗传转化体系,基因敲除菌株的形态观察发现,UePKA、UeERK和UeMKK敲除的菌株在诱导培养基上无法形成菌丝,而UeSSK能够形成菌丝,但形成速度要慢于野生型。项目共发表和录用论文9篇,其中SCI论文2篇(累计影响因子13.255),一级期刊论文4篇,授权发明专利1项,研究成果获得浙江省高等学校科研成果奖二等奖(2012)1项。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2012
期刊:农业生物技术学报
影响因子:--
作者:金荣愉;安欣欣;崔海峰;俞晓平;叶子弘
通讯作者:叶子弘
DOI:--
发表时间:2013
期刊:农业生物技术学报
影响因子:--
作者:金荣愉;崔海峰;俞晓平;叶子弘
通讯作者:叶子弘
DOI:10.1155/2013/350801
发表时间:2013
期刊:Journal of analytical methods in chemistry
影响因子:2.6
作者:Xu L;Yan SM;Ye ZH;Fu XS;Yu XP
通讯作者:Yu XP
DOI:--
发表时间:--
期刊:PLOS Biology
影响因子:--
作者:Chi Song;Jun Wang;Longjiang Fan;Jie Qiu;Zihong Ye;Sheng Yu;Yingying Wang;Ying Wang;Jiandong Bao;
通讯作者:
DOI:--
发表时间:2011
期刊:中国计量学院学报
影响因子:--
作者:赵煦泓;尤文雨;崔海峰;俞晓平;叶子弘
通讯作者:叶子弘
食品安全评价关键技术研究与应用示范-畜禽水产品及制品安全评价关键技术研究与示范应用
  • 批准号:
    2025C02125
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    0.0万元
  • 批准年份:
    2025
  • 负责人:
    叶子弘
  • 依托单位:
茭白膨大肉质茎形成的调控机制
  • 批准号:
    32011530117
  • 项目类别:
    联合基金项目
  • 资助金额:
    260万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    叶子弘
  • 依托单位:
新型碳代谢水稻与甲烷菌、稻瘟病菌及褐飞虱互作和利用研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    --
  • 资助金额:
    40万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    叶子弘
  • 依托单位:
WOPR转录因子调控菰黑粉菌致病力的作用机制研究
  • 批准号:
    31770828
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    60.0万元
  • 批准年份:
    2017
  • 负责人:
    叶子弘
  • 依托单位:
PKA对茭白黑粉菌极性生长的调节机制研究
  • 批准号:
    31470785
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    85.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    叶子弘
  • 依托单位:
不同类型茭白的遗传差异及雄茭、灰茭形成机制研究
  • 批准号:
    30940018
  • 项目类别:
    专项基金项目
  • 资助金额:
    10.0万元
  • 批准年份:
    2009
  • 负责人:
    叶子弘
  • 依托单位:
国内基金
海外基金