本项目利用酵母双杂交技术,研究了山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55和本地分离的山羊病毒流行株AKS2010的毒力因子蛋白KLP2和膜蛋白质P32分别与其感染的绵羊胎羊皮肤细胞相互作用的靶蛋白的情况。首先，应用分子生物技术克隆了山羊痘病毒疫苗株和流行株的KLP2和P32基因，并将这些基因插入到pGBKT7载体中构建成诱饵质粒。其次，培养绵羊胎羊皮肤原代细胞，培养山羊痘病毒疫苗株和分离流行株，得到山羊痘病毒流行株3株，建立山羊痘病毒感染胎羊皮肤细胞实验模型，用构建了山羊痘病毒感染的胎羊皮肤细胞cDNA酵母文库。最后，分别将携带有诱饵质粒的酵母菌Y187与携带有胎羊皮肤细胞cDNA文库的酵母菌AH109进行配合，筛选阳性菌，提取质粒并测序分析。结果KLP2疫苗株筛选的S100钙结合蛋白A13，多PDZ结构域蛋白，细胞分裂和凋亡调节因子；流行株筛选的靶蛋白有骨髓/淋巴混合血统因子；P32疫苗株筛选的靶蛋白有信号识别颗粒受体，氢离子转发ATP酶，蛋白酶体激活剂亚基；P32流行株筛选的靶蛋白有组氨酸/赖氨酸-N甲基转移酶，N型压敏钙通道亚基，锌指家族中蛋白（HKR1）。并对筛选得到的靶蛋白做了Q-RT-PCR和免疫共沉淀验证，最终7蛋白表达有升高， 3个蛋白免疫共沉淀验证可能是互作蛋白。疫苗株与流行株有一定差别。为进一步揭示羊痘病毒的分子致病机制的奠定基础。