目的:作为最重要的蛋白质降解酶之一，ADAMTS-5在调节软骨稳态中发挥重要作用，而miRNA-140在软骨中特异性表达，可以抑制ADAMTS-5的表达，延缓骨关节炎的进展。Smad3是TGF-β信号通路中的关键蛋白，miRNA-140的表达在转录和转录后水平受到抑制。有研究表明，Smad3表达的增加与膝关节软骨退行性变和丧失有关，但Smad3是否能介导miRNA-140的表达来调节ADAMTS-5尚不清楚。.方法:体外提取SD大鼠软骨细胞，IL-1β诱导后分别用Smad3抑制剂(SIS3)和miRNA-140模拟物处理。分别在处理后24、48和72 h检测ADAMTS-5蛋白和基因水平的表达。采用传统的Hulth体外方法建立SD大鼠OA模型，分别于术后2周和6周经关节腔注射装有SIS3或miRNA-140模拟物的慢病毒。12周时观察miRNA-140和ADAMTS-5在膝关节软骨组织中的蛋白和基因表达水平。同时，膝关节标本固定，脱钙，石蜡包埋，免疫组化，Safranin O/Fast Green染色，并对ADAMTS-5和Smad3进行HE染色分析。.结果:体外实验中，SIS3组ADAMTS-5蛋白及mRNA在各时间点的表达均有不同程度的下降。同时，SIS3组miRNA-140表达显著升高，miRNA-140模拟物组ADAMTS-5表达也显著下调(P < 0.05);在体内OA模型,发现ADAMTS-5蛋白质和基因表达下调不同程度SIS3和microrna - 140模拟组在三个时间点,和最重要的减少在早期阶段(2周)(P < 0.05),和microrna的表达- 140 SIS3组显著调节,与体外检测到的变化相似。免疫组化结果显示，与空白组相比，SIS3和miRNA-140组ADAMTS-5蛋白的表达显著下调，这也验证了SIS3对Smad3表达的抑制作用。与空白组相比，Smad3的表达明显受到抑制。苏木精和伊红染色结果显示，模拟SIS3和miRNA-140组软骨早期结构无明显变性。Safranin O/Fast Green染色结果相同，软骨细胞数量未明显减少，潮线完整;SIS3和miRNA-140组的Mankin评分结果明显低于其他组。. 本次研究为治疗骨关节炎提供新的方向，也为临床上治疗骨关节炎提供了理论依据。