胰脂酶mPlrp2在肝脏的条件性表达的分子机制及功能

肝硬化是目前威胁人类健康的最重要疾病之一。肝纤维化是多数慢性肝病发展的共同病理过程，其发病机理不十分清楚，也缺少有效的治疗方法。大量的研究表明肝星状细胞（Hepatic stellate cell, HSC）的激活在肝纤维化形成过程中起关键性的作用。目前还没有确定在生理状态下肝脏维生素A酯水解的酶系。我们发现胰脂酶基因胰脂肪酶相关蛋白2（murine Pancreatic lipase-related protein 2，mPlrp2）可以通过在肝脏条件性表达。本研究较为系统地研究了mPlrp2在肝脏的条件性表达的分子机制，并证实了它们在肝维生素A代谢和肝纤维化进程中的作用。1.证明了 mClps、mPlrp2参与肝脏中维生素A酯的水解, 初步解决了长期困惑人们的肝脏维生素A酯如何分解和利用的生物化学问题。研究发现在维生素A缺乏小鼠肝脏中脂肪代谢基因mPlrp2和mClps启动表达。给维生素Ａ缺乏小鼠注射甲硫腺苷能明显抑制mPlrp2和mClps的表达，导致血液中维生素A的含量下降。分析不同组织间核苷酸含量时发现脂肪水解酶mPlrp2和mClps在维生素A缺乏小鼠肝中启动表达与AdoMet和AdoHcy的比例有关。染色体免疫沉淀分析发现给小鼠喂以维生素A缺乏的食物能提高mPlrp2和mClps的启动子区域组蛋白H3K4甲基化水平，从而激活肝脏中mPlrp2和mClps的表达。分析不同细胞系中mPlrp2和mClps的表达情况，发现只有在储存维生素Ａ酯的肝星状细胞系HSC-T6中这两个基因启动表达。利用siRNA干扰HSC-T6细胞中mClps的翻译能明显减少细胞中维生素A酯的水解。2.证实抑制肝脏脂肪代谢基因mPlrp2的表达对肝纤维化具有保护作用。发现在纤维化肝脏中mClps、mPlrp2的表达被激活。S-腺苷蛋氨酸能抑制肝中mPlrp2的表达并且能明显降低维生素Ａ缺乏小鼠血清中的维生素Ａ含量和HSC-T6细胞系中维生素A酯的水解。RNAi抑制肝中mPlrp2的表达能明显改善胆管结扎诱导的肝星状细胞激活和肝纤维化。染色体免疫组化分析发现BDL小鼠肝内mPlrp2启动子区域结合组蛋白H3K4三甲基化明显上升。这些数据表明抑制肝脏脂肪代谢基因mPlrp2的表达对肝纤维化具有保护作用，mPlrp2有潜力成为肝纤维化的基因治疗新的药物靶点。