猪瘟病毒Npro和Erns抑制IFN-α/β生成作用的机理和致病性研究

在成功构建猪瘟病毒全长感染性cDNA克隆基础上，采用体外遗传操作技术，构建Erns和Npro双基因缺失突变体全长感染性cDNA克隆，体外转录RNA，转染PK15细胞恢复出重组病毒。用该重组病毒感染PK15细胞和持续表达Erns的PK15反式互补细胞系，研究Erns和Npro在抑制dsRNA和异源病毒(Sendai病毒)诱导IFN -α/β生成中的作用；采用荧光素酶基因报道系统，研究Erns和Npro对IRF3、NF-κB、ISRE和VISA等IFN-α/β表达调控因子转录激活的调节。用重组病毒接种猪，研究Erns和Npro双基因缺失重组病毒的毒力、致病性和诱导的免疫保护效力等生物学特性。从细胞和机体水平揭示Erns和Npro在CSFV致病中的作用及其分子机理，探讨Erns和Npro双基因缺失用于构建新型基因工程疫苗的可能性，为猪瘟防制提供新的理论依据和技术支撑。