采用杆状病毒表达了野生型和位于NS2跨膜区的7个位点氨基酸突变体NS23pro，分析了这些氨基酸在NS23自切割中的作用；采用感染性cDNA克隆反向遗传操作在基因组上对NS2中7个位点进行突变，体外转录vRNA转染PK15细胞拯救CSFV，并进行特性研究。结果显示，NS2蛋白第37、52、57、60、78、85和100等位点单个氨基酸突变可某种程度降低NS23的自切割活性；第60位的Asp、第78位的非Lys对于感染性CSFV产生起关键作用，这两种致死突变不取决于NS23的自切割活性高低；与野生型相比，突变体NS2在细胞中的分布及与E2的相互作用表现差异。用CSFV弱毒疫苗C株3′UTR、E2单独或同时替换强毒Shimen株对应区域构建了3种嵌合病毒，研究显示，3′UTR单替换对嵌合病毒特性没有显著影响；E2单替换导致产生感染性病毒和形成蚀斑能力一定程度下降，但在细胞传代后恢复；而E2和3′UTR双替换嵌合病毒生长特性和形成蚀斑能力显著降低，在细胞传代过程中保持稳定。这些工作加深了对CSFV复制调控和致病机制的理解，为发展猪瘟防控新策略提供新的思路。