B超引导下胚胎内显微注射技术快速建立口腔鳞状细胞癌小鼠研究模型
批准号:
81672664
项目类别:
面上项目
资助金额:
85.0 万元
负责人:
郭传瑸
依托单位:
学科分类:
H1819.肿瘤生物治疗
结题年份:
2020
批准年份:
2016
项目状态:
已结题
项目参与者:
葛娜、王佃灿、王晶、陶船思博、朱建华、赵明宇、黄超
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中文摘要
口腔癌在所有恶性肿瘤中发病率居第6位,其中90%的病理类型是鳞状细胞癌。在过去的四十年,尽管手术、放化疗的综合治疗得到推广,口腔癌的五年生存率一直徘徊在50%左右,没有明显的改善,成为严重威胁人类健康的疾病之一。实验动物模型是研究人类恶性肿瘤的重要方法和途径,也是医学生物学得以迅速发展的重要前提之一。建立一个高效、吻合度高的动物模型,使人类能够对于肿瘤的发生、发展和治疗及预防进行深入的研究和探讨。本课题拟在B超引导下进行小鼠胚胎内显微注射,将候选基因组织特异性引入胚胎上皮系统,利用RNA干扰技术,沉默抑癌基因或与细胞增殖、分化相关基因,从而观察其在小鼠皮肤及口腔黏膜上皮细胞生长发育和肿瘤形成中的作用机制。较之传统的转基因小鼠生产及制作方式,此方法具有周期短、效率高,设备简单、费用低,而且适用范围广的优势。可以完成在短期内大量候选基因的筛选工作,为口腔癌的基础研究提供了非常便利的平台。
英文摘要
Oral cancer is the 6th most common cancer worldwide, in which 90% of the histopathologic diagnosis is squamous cell carcinoma. The five-year survival is about 50% during the past forty years, although the comprehensive treatment with surgery and chemo-radio therapy is put into widely application. It is still one of the deadly diseases which threatened the public health. Animal model is not only the important methodology and approach for cancer research, but also the premise for rapid development of medical biology. Setting up of an efficient and matching animal model makes it possible to explore the initiating, development of cancer and further the research on therapy and prevention. This project will take advantage of RNA interference technique to silence the cancer suppressor gene with ultrasound guided in utero microinjection to mice. It can tissue-specified target the epidermis system with candidate genes, which is a way to find out their effects on skin and oral mucous epithelial cell growth during development and tumorigenesis. This breaking-through technology has the advantages of shorten research period, high efficiency, simple equipment requirement, affordable cost and broadly application fields when compared with the conventional procedures of transgenic mouse. It brings the possibility to screening a large scale candidate genes pool in a considerable short period of time. This makes a great platform for oral cancer research in the future.
口腔癌是口腔颌面部常见的恶性肿瘤,其中90%口腔癌的病理类型是鳞癌。尽管口腔肿瘤的治疗和修复手段在近些年有了很大的发展,但口腔鳞癌的五年生存率一直徘徊在60%左右,没有明显的改善。实验动物模型是研究人类恶性肿瘤的重要方法和途径,也是医学生物学得以迅速发展的重要前提之一。建立一个高效、吻合度高的动物模型,使人类能够对于肿瘤的发生、发展和治疗及预防进行深入的研究和探讨。本课题根据口腔癌发生的两大主要因素:生物因素(病毒感染)和化学因素(致癌剂),分别构建了两种口腔癌发生模型。病毒感染导致的口腔癌模型是利用B超引导下进行小鼠胚胎内显微注射技术,将筛选出来的候选基因(siSRPK1病毒、siDCS2病毒、siEIFB5病毒、siP53病毒、siPTEN病毒、Mettl3过表达病毒、和Rad51过表达病毒、以及多种miRNAs正义和反义构成miRs sponge病毒)组织特异性引入不同遗传背景(野生型小鼠、K14-cre P53 KO小鼠、K14-cre PTEN KO小鼠、K14-cre P53 R270H小鼠和K14-cre Kras 突变小鼠)的小鼠胚胎原始口腔部位,结果发现利用Beronja的方法可以造成口腔组织增生癌变。候选基因与小鼠遗传背景造成的癌症易感性之间的关系还需在进一步深入研究才能确定。除了B超引导下进行小鼠胚胎内显微注射病毒技术建立口腔鳞癌模型外,我们还研究了如何改进经典化学致癌剂DMBA建立口腔癌模型,并利用此技术建立了一株仓鼠口腔癌的细胞系,结果证实DMBA刺激引起口腔癌不需要长期的刺激,15次局部刺激就可以产生致癌的效果,但需要给予较长的时间形成肿瘤。由此我们推出,只要DMBA可以刺激到上皮基底层细胞,或许单次足够剂量就可以产生癌变。但突变的上皮基底细胞需要在特定条件下才能产生肿瘤。这是我们的推测,还需要实验数据加以验证。另外,我们建立的仓鼠细胞系在仓鼠体内具有形成肿瘤的能力。随后通过对临床口腔癌组织、小鼠及仓鼠口腔癌病理组织的高通量、免疫组化、real-time PCR、western blot、RIP、 meRIP-seq等一系列研究分析,发现m6A RNA甲基化基因在口腔癌的发生发展中其非常重要的作用,并进一步证实Mettl3 在口腔癌发生发展的作用及分子机制。本研究对探讨口腔癌模型建立及发生发展具有重要指导意义。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Niclosamide Induces Cell Cycle Arrest in G1 Phase in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma Through Let-7d/CDC34 Axis
氯硝柳胺通过 Let-7d/CDC34 轴诱导头颈鳞状细胞癌 G1 期细胞周期停滞
DOI:10.3389/fphar.2018.01544
发表时间:2019-01-09
期刊:FRONTIERS IN PHARMACOLOGY
影响因子:5.6
作者:Han, Zewen;Li, Qingxiang;Guo, Chuanbin
通讯作者:Guo, Chuanbin
MR imaging as a precise technique to evaluate skull-base tumor volume: Comparison of CT, MR imaging and FDG PET from murine and clinical data
MR 成像作为评估颅底肿瘤体积的精确技术:来自小鼠和临床数据的 CT、MR 成像和 FDG PET 的比较。
DOI:10.1016/j.jcms.2019.12.007
发表时间:2020-01-01
期刊:JOURNAL OF CRANIO-MAXILLOFACIAL SURGERY
影响因子:3.1
作者:Li, Qing-Xiang;Yang, Rong;Guo, Chuan-Bin
通讯作者:Guo, Chuan-Bin
DOI:doi: 10.1016/j.ijom.2020.07.037
发表时间:2020
期刊:Int J Oral Maxillofac Surg
影响因子:--
作者:Li Q;Wang Y;Xu L;Wang L;Guo Y;Guo C
通讯作者:Guo C
Cancer stemness of CD10-positive cells regulated by Hedgehog pathway promotes the resistance to cisplatin in oral squamous cell carcinoma.
Hedgehog通路调控的CD10阳性细胞的癌症干性促进口腔鳞状细胞癌对顺铂的耐药性。
DOI:10.1111/odi.13673
发表时间:2020-10
期刊:Oral diseases
影响因子:3.8
作者:Yifei Wang;Qingxiang Li;Le Xu;Junpeng Chen;Yinfei Pu;Lin Wang;Hongfang Sun;Yuxing Guo;Chuanbin Guo
通讯作者:Chuanbin Guo
Development and validation of nomogram for prediction of malignant transformation in oral leukoplakia: A large-scale cohort study
用于预测口腔白斑恶变的列线图的开发和验证:一项大规模队列研究
DOI:10.1111/jop.12862
发表时间:2019-07-01
期刊:JOURNAL OF ORAL PATHOLOGY & MEDICINE
影响因子:3.3
作者:Wang, Tianjiao;Wang, Lin;Guo, Chuan-Bin
通讯作者:Guo, Chuan-Bin
CD10阳性肿瘤干细胞在头颈癌“干”性维持中的作用机制探索
- 批准号:81972540
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:郭传瑸
- 依托单位:
IL-24调控维持上皮细胞分化稳态的作用及机制研究
- 批准号:81470707
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:73.0万元
- 批准年份:2014
- 负责人:郭传瑸
- 依托单位:
口腔鳞癌淋巴转移模型的建立及VEGF-C/D与口腔鳞癌淋巴转移相关性研究
- 批准号:81341062
- 项目类别:专项基金项目
- 资助金额:10.0万元
- 批准年份:2013
- 负责人:郭传瑸
- 依托单位:
青春双歧杆菌/胞嘧啶脱氨酶基因靶向治疗口腔鳞癌的研究
- 批准号:30872899
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:30.0万元
- 批准年份:2008
- 负责人:郭传瑸
- 依托单位:
国内基金
海外基金















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