核因子-kappaB(NF-κB)被认为是重要的抗炎、抗肿瘤靶点，其抑制剂不断被发掘。我们在国家自然科学基金的资助下，成功获得系列具有自主知识产权的新型NF-κB拮抗多肽。其中HP-10对Lovo细胞增殖的抑制作用与五-氟尿嘧啶相当，但其对NF-κB的抑制作用较弱，提示HP-10可能存在其它作用靶点。本项目拟通过离体、在体实验明确其对Lovo细胞凋亡/周期相关蛋白是否具有调节作用，然后检测其在细胞内的相互作用蛋白，并通过后续实验进行验证。结果显示，不带穿膜序列的HP-10可直接进入细胞，在体内外对Lovo细胞具有明显的抑制作用，该作用是通过诱导细胞凋亡而产生的。发现以HP-10进行亲和筛选相互作用蛋白具有结构柔性的局限性，改以HP-10刚性类似化合物——吴茱萸碱进行筛选，发现其细胞内的相互作用蛋白为芳香烃受体（AhR），利用生物分子相互作用分析检测，证实二者的解离平衡常数KD为57.72nM。利用生物信息学的同源模建和柔性对接方法，发现吴茱萸碱在AhR分子上的结合位点为Phe285、Phe295、Gly304、Val307、Leu308、Ile325、Cys333、Met348、Val363、Ser365。成功获得吴茱萸碱的单克隆抗体，并通过免疫荧光检测证实吴茱萸碱与AhR在Lovo细胞内存在共定位。上述结果为进一步揭示HP-10刚性类似化合物——吴茱萸碱通过作用于AhR进而发挥抗肿瘤作用的机制提供了重要线索，而且可为进一步优化其结构以获得开发前景更加优越的抗肿瘤药物奠定基础。