人锌指基因ZNF580及其小鼠同源基因ZFP580的功能分析

为研究与动脉粥样硬化(AS)发生相关的人C2H2型锌指基因ZNF580及其小鼠同源基因ZFP580的功能，拟克隆C57BL/6J鼠ZFP580基因的cDNA序列，表达纯化人ZNF580、小鼠ZFP580蛋白，制备二者的多克隆抗体。采用选择性亲和结合层析技术,分析确定ZNF580基因所调控的顺式作用元件序列。以已构建真核表达载体及pEGFP-C1空载体转染人脐静脉内皮细胞，基因芯片检测技术分析两组细胞的差异表达基因。利用Genbank数据库及RT-PCR、Western blot 分析ZNF580锌指蛋白所调控的下游靶基因。建立小鼠AS模型,免疫组化技术检测 ZFP580基因在正常小鼠及AS模型小鼠主动脉内皮细胞、平滑肌细胞中的差异表达情况。在动物整体、细胞、分子水平探讨ZFP580基因表达与血浆LDLc水平及AS发生的相关性,为进一步阐明人AS发生相关基因调控网络提供新的科学依据。