SUMO-2激活蛋白质翻译的分子机制研究
项目介绍
AI项目解读
基本信息
- 批准号:30970651
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:30.0万
- 负责人:
- 依托单位:
- 学科分类:C0505.蛋白质、多肽与酶生物化学
- 结题年份:2012
- 批准年份:2009
- 项目状态:已结题
- 起止时间:2010-01-01 至2012-12-31
- 项目参与者:袁洪峰; 吴刚; 韩健; 程茗; 刘东擘;
- 关键词:
项目摘要
SUMO化是近来发现的一种蛋白质翻译后修饰,研究显示,SUMO化在基因的转录调控中起重要作用,以抑制为主,而目前其在蛋白质翻译中的调控作用则知之甚少。我们前期实验结果显示,尽管SUMO化也可抑制报告基因LUC的转录,但却明显激活LUC蛋白的翻译,以SUMO-2的表现最为突出,且我们在蛋白翻译起始复合物中也查见SUMO-2化修饰。为了探究SUMO-2活化蛋白质翻译的分子机制,本项目拟首先筛选获得高表达SUMO-2的稳定细胞株,后通过饥饿和血清刺激启动细胞蛋白翻译进程,m7-GTP琼脂糖凝胶行Pull-down实验,浓缩纯化蛋白翻译起始复合物;随后应用质谱技术,在下拉蛋白中搜寻可被SUMO-2化的靶蛋白,同时确定SUMO-2化的赖氨酸位点;最后通过相应的生物学技术手段,确证靶蛋白SUMO-2化以及激活蛋白质翻译的分子机制。本项目的实施将为深入了解SUMO-2化激活蛋白质翻译的分子机制提契机。
结项摘要
SUMO化是近来发现的一种蛋白质翻译后修饰,研究显示,SUMO化在基因的转录调控中起重要作用,以抑制为主,而目前其在蛋白质翻译中的调控作用则知之甚少。我们前期试验结果显示,尽管SUMO化也可抑制报告基因LUC的转录,但却明显激活LUC蛋白的翻译,以SUMO-2的表现最为突出,且我们在蛋白质翻译起始复合物中也查见SUMO-2化修饰。为了探究SUMO-2活化蛋白质翻译的分子机制,我们从以下四个方面进行了探索研究:1)SUMO-2是否能促进DNA的转录,生成高水平的mRNA;2)是否激活了与蛋白质翻译密切相关的mTOR信号通路;3)是否促进了活性真核细胞起始因子复合物的形成;4)是否通过修饰靶蛋白起作用。结果显示SUMO-2对mRNA水平和mTOR信号通路均无影响,而是通过促进eIF4E和eIF4G的相互作用形成大量有活性的eIF4F来激活蛋白质翻译的,此过程与其修饰密切相关,但形成eIF4F复合物的三个核心成员eIF4E、eIF4A和eIF4G均不是SUMO-2促进蛋白质翻译的靶蛋白。这些结果使我们对蛋白质翻译的分子机制有了深一步的认识,为与蛋白质翻译相关性疾病的治疗提供了新的线索。
项目成果
期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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