多途径诱导端粒失稳定治疗喉磷癌的基础研究

与正常体细胞相比，恶性肿瘤细胞端粒结构在端粒酶或ALT机制(端粒延伸替代机制)作用下能保持相对的稳定从而获得无限增殖的能力。端粒酶途径关键蛋白为hTERT。我们发现NBS1、RAD51及TRF2是ALT机制的重要功能蛋白。本项目中我们拟构建能同时表达四种不同shRNA片断的真核表达载体：pEGFP-TERT-NBS1-RAD51-TRF2，其表达的shRNA特异靶向hTERT及NBS1、RAD51、TRF2 mRNA。常规培养喉磷癌Hep-2、Lscc-2以及端粒酶受抑制后端粒酶阴性的残存Hep-2细胞，常规建立荷Hep-2、荷残存Hep-2细胞的裸鼠移植瘤模型。进一步将该表达载体转染离体、在体的癌细胞，研究多途径诱导端粒失稳定对这些离体、在体癌细胞的治疗作用、对端粒结构影响以及对实验动物的毒副作用等。本项目研究将探讨某些理论未知并指导以端粒为靶向的喉癌及同类型恶性肿瘤的基因治疗。