睾丸特异表达基因LM23的性质和功能研究

该项目拟对本实验室前期研究中发现的大鼠睾丸特异表达基因LM23的性质和功能展开研究，探讨精子发生过程中的分子事件。拟采用显微注射和电穿孔相结合的方法，在大鼠活体内对LM23进行RNA干扰（RNAi）操作，建立活体LM23基因沉默的模型；再用抑制性消减杂交技术（SSH）筛选LM23基因沉默引起的上调和下调的差异表达基因，了解与该基因有关的基因网络；用荧光定量PCR和免疫共沉淀等方法，进一步研究LM23 和筛选出的差异表达基因的相互调控关系。此外，构建LM23融合蛋白原核表达载体，纯化蛋白及制备抗体，检测LM23蛋白的组织表达定位。本项目的完成将会对LM23基因的性质、功能和信号转导通路中的关键分子有较全面的了解，建立一种简便、可行的活体研究基因功能的模型，为后基因组时代基因功能研究提供新思路。为发展新型避孕节育手段和不育症的诊治提供理论和实验数据。