课题基金基金详情
基于多酶调控的Alcaligenes sp.合成威兰胶的代谢工程研究
结题报告
批准号:
21106062
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
25.0 万元
负责人:
陈晓晔
依托单位:
学科分类:
B0812.生物化工与合成生物工程
结题年份:
2014
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
李莎、李会、孙秋君、支秋霞、陶颖、吴猛
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
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中文摘要
威兰胶是一种结冷胶类微生物多糖,在采油和高品质建材领域有广阔应用前景。本课题以一株高产威兰胶的具有自主知识产权的Alcaligenes sp. CGMCC2428为对象,研究与糖核苷酸合成和单糖连接有关的三个关键酶RhsA、PgmG、GelK及其基因,将这三种基因分别和组合导入目的菌株中,以实现高效表达。对构建的基因工程菌和出发菌的代谢通量进行计算和比较,设计最优的代谢工程操作方案,实现多酶及其代谢途径的有效调控,最终达到最高威兰胶产率和转化率的目的。该研究对揭示微生物合成威兰胶的代谢机理,从而提高威兰胶合成效率,促进结冷胶多糖生产技术的发展,具有重要的学术意义和实用价值。
英文摘要
威兰胶是一种重要的结冷胶类微生物多糖,它以其分子结构多样性、独特的物理学和流变学特性以及使用安全性,在工业生产和生活的许多领域具有广泛的应用价值。由于受到生产率低下,生产成本昂贵,合成机制不清楚等诸多问题的影响,导致生产水平不高,限制了威兰胶类多糖大规模产业化发展。.本研究以一株威兰胶生产菌Alcaligenes sp.为研究对象,采用基因工程和代谢工程技术,首次对威兰胶生物合成机理展开研究,揭示了微生物合成威兰胶的代谢机理,从而提高威兰胶合成效率。丰富了结冷胶类多糖合成的分子生物学信息,为结冷胶类多糖菌种代谢工程改造,促进这类多糖生产技术的发展,有重要的经济价值。研究工作主要如下:.1、通过兼并引物设计,克隆出编码威兰胶糖苷酸前体合成途径关键酶基因,并对这4个关键酶编码基因进行基本特性分析,发现这4个关键酶基因均与鞘氨醇单胞属相似性最高。.2、通过分子生物学手段克隆构建含编码威兰胶糖苷酸前体合成途径关键酶基因的质粒,将其转化入目的宿主,考察编码基因的表达情况及其编码的相关酶的性质。.3、进一步构建威兰胶合成能量代谢途径,解析了菌体能量代谢对威兰胶合成的重要影响。.4、通过人工添加外源物质强化多酶调控的威兰胶合成途径,使得威兰胶合成能力大幅提高。.5、人工选育工业理想型威兰胶高产菌株,并解析菌株多酶调控机制,实现低成本高效率威兰胶合成,能够更好的满足工业生产需求,极大节约工业过程能耗和生产成本。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:10.1016/j.carbpol.2011.09.026
发表时间:2012-01-15
期刊:CARBOHYDRATE POLYMERS
影响因子:11.2
作者:Li, Hui;Xu, Hong;Ouyang, Pingkai
通讯作者:Ouyang, Pingkai
Improvement of welan gum biosynthesis and transcriptional analysis of the genes responding to enhanced oxygen transfer by oxygen vectors in Sphingomonas sp.
鞘氨醇单胞菌中韦兰胶生物合成的改进和对氧载体增强氧转移作出响应的基因的转录分析。
DOI:10.1016/j.bej.2014.06.011
发表时间:2014-09
期刊:Biochemical Engineering Journal
影响因子:3.9
作者:Ping Zhu;Shuhao Dong;Sha Li;Xiaoying Xu;Hong Xu
通讯作者:Hong Xu
Rhamsan gum production by Sphingomonas sp. CGMCC 6833 using a two‐stage agitation speed control strategy
使用两级搅拌速度控制策略使用鞘氨醇单胞菌 CGMCC 6833 生产鼠李糖胶
DOI:10.1002/bab.1185
发表时间:2014
期刊:Biotechnology and Applied Biochemistry
影响因子:2.8
作者:Xiao Ying Xu;P. Zhu;Sha Li;Xiao Ye Chen;Xingjian Jiang;Hong Xu
通讯作者:Hong Xu
Production of rhamsan gum using a two-stage pH control strategy by Sphingomonas sp. CGMCC 6833.
使用鞘氨醇单胞菌 (Sphingomonas sp) 的两阶段 pH 控制策略生产鼠李糖胶。
DOI:--
发表时间:2014
期刊:Appl Biochem Biotechnol
影响因子:--
作者:Ying, Xu Xiao;Ping, Zhu;Sha, Li;Ye, Chen Xiao;Zhong, Yao;Hong, Xu
通讯作者:Hong, Xu
Improvement of welan gum production and redistribution of metabolic flux under pH control process in Alcaligenes sp CGMCC2428
产碱菌 CGMCC2428 pH 控制过程中韦兰胶生产的改进和代谢通量的重新分配
DOI:10.1007/s12257-012-0423-5
发表时间:2013-04-01
期刊:BIOTECHNOLOGY AND BIOPROCESS ENGINEERING
影响因子:3.2
作者:Li, Hui;Li, Sha;Ouyang, Pingkai
通讯作者:Ouyang, Pingkai
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