接枝型智能聚合物介导的蛋白质体外折叠过程基础研究

智能型聚合物介导的蛋白质体外折叠过程是蛋白质体外折叠技术中的一个新的生长点。本文提出将线型聚异丙基丙烯酰胺（PNIPAAm）接枝到聚苯乙烯（PS）表面后用于蛋白质体外复性的新技术，合成新型蛋白质折叠促进剂PS-grafted-PNIPAAm微球，对其形态结构、表面特征及PNIPAAm毛发的温敏性能进行表征；考察其对不同蛋白样品的协助复性效果，建立复性动力学方程；测定复性过程中折叠中间体的形成及变化，从蛋白质分子结构和疏水性角度探讨PNIPAAm毛发协助复性机理；用RAFT聚合法在毛发末端引入-SH功能基团，使之兼具抑制多肽链间二硫键错配功能并用于蛋白质复性；增大PS核心粒径或引入磁性物质，提高分离回收性能；将PNIPAAm分子链固定在介质上制成层析复性柱，提高复性效率及重复利用性。上述研究对于发展蛋白质折叠的新介质和新方法，推动该技术在生物技术基础研究和工业实践方面的应用具有重要意义。