冷却肉中主要致病菌的微生物预测模型建立

本项目以冷却猪肉中主要食源性致病菌为研究对象，首先建立多重PCR快速检测方法，并应用该方法对猪肉市场进行调查，在调查结果基础上，对主要污染的致病菌应用real-time PCR建立其在猪肉中的生长预测模型，同时与传统平板培养计数法建立的模型进行比较验证，最终将建立的生长预测模型整合成“猪肉中主要致病菌三级预测模型”软件（Pork Pathogens Predictive Model, Pork PPM）。具体包括：.（1）猪肉中主要食源性致病菌多重PCR快速检测方法建立：首先建立了猪肉中主要食源性致病菌（沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、小肠结肠炎耶尔森菌和大肠杆菌O157:H7）五重PCR快速检测方法，运用该方法对猪肉市场进行了调查，结果表明，金黄色葡萄球菌检出率居首位。进而，重点建立了猪肉中金黄色葡萄球菌生长预测模型，同时，由于单增李斯特氏菌生存环境可塑性大，具有低温生长繁殖能力和较高致死率特点，亦重点建立了真空包装冷却猪肉中单增李斯特菌生长预测模型。.（2）猪肉中金黄色葡萄球菌生长预测模型建立：首先建立了猪肉中金葡菌real-time PCR（SYBR Green 染料法和TaqMan探针法)快速检测方法，进而选取运用SYBR Green染料法real-time PCR用于建立猪肉中金葡菌生长预测模型，并与传统平板培养计数法建立的模型进行比较，确证此模型应用的可行性。.（3）真空包装冷却猪肉中单增李斯特菌生长预测模型建立：首先建立基于DNA和RNA的(RT-) real-time PCR快速检测技术，进而选取基于DNA的real-time PCR方法建立了冷却猪肉中单增李斯特菌生长动力学模型，并与传统平板培养计数法建立的模型进行比较，确证此模型应用的可行性。.（4）Pork PPM软件：该软件中，目前包括猪肉中金葡菌生长预测模型、真空包装冷却猪肉中单增李斯特菌生长预测模型。今后还将增加其他致病菌生长预测模型。该软件包括基于传统平板培养计数和基于real-time PCR两种方法的生长预测模型。.（5）其他工作：应用PCR-DGGE研究了肉中初始污染的细菌组成；另外建立了O157和沙门氏菌real-time PCR快速检测方法，为一步建立其分子预测模型和完善Pork PPM软件奠定基础。.该项目已发表论文7篇，其中SCI论文3篇。申请专利1项。