SIRT6调控心肌肥大的分子机制研究

本课题研究工作按计划实施，顺利完成。（1）首先，我们通过筛选发现Sirtuins家族成员SIRT6在心肌肥大的模型中变化最为明显，通过构建SIRT6及其酶突变体质粒和SIRT6的RNA干扰序列，系统地研究了SIRT6对心肌细胞肥大的影响，发现过表达SIRT6的野生型质粒能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，过表达其酶突变体质粒H133Y则无此效应，而在心肌细胞中特异性沉默SIRT6则能够模拟AngⅡ的作用诱导心肌肥大的发生，进一步明确了SIRT6在心肌肥大病理过程中的重要作用；（2）在此基础上，我们进一步利用免疫共沉淀、报告基因等方法研究SIRT6抑制心肌肥大的调控机制，发现在心肌细胞中SIRT6与NFκB催化亚基p65发生相互作用，并且这种相互作用能被AngⅡ增强；阻断NFκB能够抑制SIRT6基因沉默诱导的心肌细胞肥大；此外，过表达SIRT6可抑制NFκB报告基因的活性。我们已在药理学权威杂志British Journal of Pharmacology上发表了这一部分的研究结果，并得到了该杂志编辑和审稿人的高度肯定；（3）作为Ⅲ型组蛋白去乙酰化酶Sirtuins家族主要特点是NAD依赖性，Nmnat2是NAD合成的限速酶。我们通过研究SIRT6的上游Nmnat2在心肌肥大中的功能及机制，发现过表达Nmnat2的野生型质粒能够抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大，且此效应依赖于其NAD合成活性。沉默了SIRT6能够明显逆转Nmnat2的心肌保护作用，结果我们已经发表在FEBS Letters等杂志上；（4）建立了腺病毒细胞转染技术，发现心肌细胞转染Ad-RIP140后，可抑制脂肪酸代谢、线粒体氧化磷酸化、葡萄糖代谢以及线粒体膜电位，增加细胞内自噬， 转染PGC-1α可减弱此作用，从心肌细胞调控能量代谢调节角度解释了SIRT6的作用，研究结果已发表在Mol Cell Endocrinol等杂志上。. 通过本课题的实施，我们揭示 了SIRT6参与心肌肥大的上下游调节机制及相关的信号分子，明确了SIRT6通过酶活性依赖性方式参与心肌肥大的抑制性调节，且与能量代谢关系密切。提示SIRT6有可能作为心肌肥大治疗的潜在靶点。在SCI收录杂志论文发表发表标注本基金号的研究论文13篇，中文核心期刊3篇，培养博士研究生3人，硕士研究生2人，达到或超过了课题的预期目标