miR-586和miR-98靶向调控牙本质基质蛋白1对牙髓干细胞定向分化为成牙本质细胞的影响及作用机制

批准号:
81371137
项目类别:
面上项目
资助金额:
70.0 万元
负责人:
吴补领
依托单位:
学科分类:
H1503.牙体牙髓及根尖周组织疾病
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
高杰、侯晋、黄欣、岳静、陈婷、罗傲翔、王贺
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中文摘要
牙髓炎和根尖周炎是目前口腔临床上最常见的疾病,针对感染牙髓理想的治疗方法为牙髓再生,其关键在于干细胞的成牙分化、三维结构形成和血运的构建。本项目拟通过与内皮前体细胞3D共培养解决后面两个问题,研究的重点为细胞和动物层面研究microRNA对干细胞成牙分化的调控作用及其机制。拟采用3D细胞共培养模型和牙髓再生的人牙齿空根管的小鼠模型,为模拟牙髓发育过程中的细胞组成将miR-586和miR-98基因转染加入人牙髓干细胞后,与内皮前体细胞进行3D共培养,形成3D立体的细胞球,通过人牙齿空根管的小鼠模型,探索miR-586和miR-98基因表达抑制能否通过调控牙本质基质蛋白1,来影响牙髓干细胞定向分化为成牙本质细胞,以了解牙髓再生过程中成牙本质细胞分化的调控机制,并且可以通过构建稳定可靠的miR-586及miR-98基因转染人牙髓干细胞细胞系,以此为种子细胞,进行进一步牙髓再生的研究。
英文摘要
Pulpitis and apical periodontitis is the most common disease which dentist faces in the present.The ideal treatment for infected pulp is pulp regeneration, the keys of which is odontoblast differentiation of stem cells,three-dimensional structure and blood supply. To solve the latter two keys,stem cells would 3D co-culture with endothelial progenitor cells in this study.The focus of the study is based on 3D cell co-culture model and animal model to study the regulation and mechanism of microRNA target odontoblast differentiation of stem cells at the level of cell and animal. Based on the 3D cell co-culture model and the human tooth pulp regeneration in a mouse model of the empty root canal, human dental pulp stem cells are transfected miR-586 and miR-98 gene,and then the formation of the 3D ball of cells by 3D co-culture which with endothelial progenitor cells. By the mouse model of human tooth empty root canal, the study would explore whether anti-miR-586 and anti-miR-98 gene expression can target dentin matrix protein 1,then target odontoblast differentiation of dental pulp stem cells, to understand the regulation mechanism of odontoblast differentiation during pulp regeneration, then construct transfect nti-miR-586 and anti-miR-98 cells to establish stable human dental pulp stem cell cell line, which to provide seed cells for tissue engineering pulp regeneration research.
口腔内科中,牙髓及根尖周病的诊治一直以来都是依赖于根管治疗技术及其相关辅助设备的发展,而随着近年来再生医学和组织工程学的发展,牙体牙髓病治疗与研究的热点也逐渐聚焦到牙髓再生这个概念上,即牙髓的再生或牙的再生。.本实验旨在以人牙髓干细胞作为种子细胞,深入研究miR-586对其成牙本质向分化及成血管相关特性变化的调控作用。本实验将构建miR-586表达抑制的慢病毒,并将其转染入牙髓干细胞中且稳定表达。将此稳定转染的牙髓干细胞与内皮前体细胞进行共培养,分别对共培养物进行矿化诱导及成血管诱导培养,观察其各项矿化特性及血管形成特性,观察miR-586表达抑制处理后的此共培养物,是否能在不影响内皮前体细胞血管生成特性的基础上,同时促进共培养物向成牙本质细胞向分化。旨在让此miR-586表达抑制人牙髓干细胞和内皮前体细胞的共培养物既能向成牙本质细胞分化,又不影响其血管新生的能力,并将此细胞共培养模型作为牙髓再生后续实验的理想细胞组合。.研究过程中,我们成功构建了miR-586表达抑制人牙髓干细胞/内皮前体细胞的细胞共培养模型,可作为较好的种子细胞组合,用于牙髓再生研究。研究结果发现:内皮前体细胞共培养及miR-586表达抑制的同时应用,对于定向诱导人牙髓干细胞向成牙本质细胞分化具有协同促进作用。将内皮前体细胞与人牙髓干细胞进行直接接触共培养,能促进人牙髓干细胞的成牙本质向分化。另一方面,miR-586表达抑制对于人牙髓干细胞/内皮前体细胞共培养中的成血管特性有间接促进作用。将人牙髓干细胞与内皮前体细胞进行直接接触共培养,能促进内皮前体细胞的血管新生。以上结论为牙髓再生的后续实验提供了较好的理论基础,有助于后续体内实验的深入研究。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Proteomic analysis of mesenchymal stem cells from normal and deep carious dental pulp.
正常牙髓和深层龋齿牙髓间充质干细胞的蛋白质组学分析
DOI:10.1371/journal.pone.0097026
发表时间:2014
期刊:PloS one
影响因子:3.7
作者:Ma D;Cui L;Gao J;Yan W;Liu Y;Xu S;Wu B
通讯作者:Wu B
DOI:10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2016.07.002
发表时间:2016
期刊:牙体牙髓牙周病学杂志
影响因子:--
作者:邓子龙;吴补领;闫文娟;屈茜;陈明;吕晓琳;陈佳婧
通讯作者:陈佳婧
Potential Role of Long Non-Coding RNA in Osteogenic Differentiation of Human Periodontal Ligament Stem Cells
长非编码RNA在人牙周膜干细胞成骨分化中的潜在作用
DOI:10.1902/jop.2016.150592
发表时间:2016-07-01
期刊:JOURNAL OF PERIODONTOLOGY
影响因子:4.3
作者:Qu, Qian;Fang, Fuchun;Ge, Yihong
通讯作者:Ge, Yihong
DOI:10.15956/j.cnki.chin.j.conserv.dent.2015.03.009
发表时间:2015
期刊:牙体牙髓牙周病学杂志
影响因子:--
作者:伍婉翠;吴补领;陈广盛
通讯作者:陈广盛
A novel frameshift mutation in the NMTS domain of RUNX2 in a Chinese family with cleidocranial dysplasia
中国锁骨颅骨发育不良家系中 RUNX2 NMTS 结构域的新移码突变
DOI:--
发表时间:2017
期刊:International Journal of Clinical and Experimental Pathology
影响因子:1.4
作者:Chen Ting;Peng Ling;Li Mei-Yi;Fang Fu-Chun;Lu Ting;Liu Zhao;Liu Fei;Mo Jia-Wen;Song Ci;Xiong Fu;Wu Bu-Ling
通讯作者:Wu Bu-Ling
lnc-SYK-2/hnRNPK/VEGF新途径调控人牙髓干细胞成血管分化的机制研究
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55万元
- 批准年份:2021
- 负责人:吴补领
- 依托单位:
长链非编码RNA-SNHG3作为ceRNA参与miR-885-5p调控人牙髓干细胞成牙本质样分化中DSPP基因的机制研究
- 批准号:81870755
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:57.0万元
- 批准年份:2018
- 负责人:吴补领
- 依托单位:
整合素α5(Integrin-α5)对人牙髓干细胞成牙本质向分化的调控及作用机制研究
- 批准号:81670986
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:58.0万元
- 批准年份:2016
- 负责人:吴补领
- 依托单位:
国内基金
海外基金
