课题基金基金详情
EGFP追踪艾灸激励VD大鼠神经新生及其与宿主突触电传递建立机制
结题报告
批准号:
81873370
项目类别:
面上项目
资助金额:
52.0 万元
负责人:
杨骏
依托单位:
学科分类:
H3118.中医针灸学
结题年份:
2022
批准年份:
2018
项目状态:
已结题
项目参与者:
王频、唐友斌、刘礼梅、王萍、汪林英、赵斌、樊吟秋、崔竟成、周超
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中文摘要
课题组在上一个基金(NO:81473785)研究中发现,艾灸治疗血管性痴呆(VD)存在着调控“神经血管小生境”促脑内神经新生与血管新生的cross-talk机制。然而艾灸在神经血管新生基础上的神经突触重塑机制不明,成为课题组下一步的研究目标。本研究采用二血管完全阻断VD动物模型,分离同源基因胎鼠神经干细胞(NSCs),培养并经逆转录病毒携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染标记,定向移植于VD大鼠侧脑室,艾灸治疗,免疫荧光双标激光共聚焦追踪观察NSCs分化、成熟与神经轴突再生相关特异蛋白表达,以及新生神经元PSD-95、P-synapsin-I突触相关蛋白表达,探明艾灸对神经新生及其突触形成关键过程影响;荧光下全细胞膜片钳记录EGFP阳性神经元突触后电流和电传递,结合电镜下突触形态学微观研究,分析与宿主神经网络功能整合,研究艾灸干预突触功能重建的作用途径和机制,为灸治该病提供依据。
英文摘要
In the last Fund (NO:81473785) the research group found moxibustion in treatment of vascular dementia (VD) existing the mechanism of cross-talk between neurogenesis and angiogenesis promotion by regulating neurovascular niche in the brain. However, moxibustion on angiogenesis of newborn neurons and synaptic plasticity mechanism is unknown, have become a research target in the next step. The study used two blood vessel blocking VD animal model, Separation neural stem cells (NSCs) of homologous genes from fetal rat, cultivate in vitrlo and marked by retrovirus with enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene transfection. and directional transplantation in VD rat lateral ventricle.treating of moxibustion on head acupoints and setting control groups. immunofluorescence double labeling and confocal laser microscope will be utilized to track specific protein expression in differentiation, maturation process of the NSCs, the axonal regeneration and new neurons PSD - 95, P - synapsin -i synaptic related protein expression, to research the moxibustion influence on newborn neurons and synapses formed key process,Whole cell patch clamp will be applied to record the postsynaptic currents and electric transmission of EGFP positive neurons under the fluorescence microscope.to analysis it functional integration with host neural network. All above examine the effect of moxibustion intervention synaptic reconstruction pathways and mechanisms, provide the basis for moxibustion cure the disease.
课题组在上一个基金(NO:81473785)研究中发现,艾灸治疗血管性痴呆(Vascular dementia,VD)存在着调控“神经血管小生境”促脑内神经新生与血管新生的cross-talk机制。然而艾灸在神经血管新生基础上的神经突触重塑机制不明。本研究采用二血管完全阻断VD动物模型,分离同源基因胎鼠神经干细胞(NSCs),培养并经逆转录病毒携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染标记,定向移植于VD大鼠侧脑室,艾灸治疗,免疫荧光双标激光共聚焦追踪观察NSCs分化、成熟与神经轴突再生相关特异蛋白表达,以及新生神经元PSD-95、P-synapsin-I突触相关蛋白表达,探明艾灸对神经新生及其突触形成关键过程影响;全细胞膜片钳记录海马兴奋性神经元和抑制性神经元突触放电活动,检测突触电生理特征。研究发现各组治疗前后水迷宫实验逃避潜伏期均有显著差异,治疗后组间比较显示NSCs+艾灸组疗效最佳。免疫荧光实验显示4组治疗组与模型组对比海马内NeuN、MAP2、GAP43、NF200、PSD95、P-synapsin-I的表达均有显著差异,NSCs+艾灸组NeuN、GAP43、NF200、PSD95、P-synapsin-I表达与余3组治疗组均有显著差异。全细胞膜片钳实验显示NSCs+艾灸组的AMPAR-sEPSC、sIPSC频率、幅度与模型组、NSCs+空白组、NSCs+西药组有显著差异,NMDAR-sEPSC幅度与模型组和其他治疗组对比差异显著。化瘀通络灸可能通过调控NSCs分化成熟、神经轴突再生、神经新生及突触形成等多个环节促进海马神经新生,并通过促进新生神经元与宿主神经网络功能整合改善症状。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2023
期刊:安徽中医药大学学报
影响因子:--
作者:王维顺;杨骏;樊吟秋;王萍;查必祥;孔钰;张雅婷
通讯作者:张雅婷
DOI:10.13702/j.1000-0607.190295
发表时间:2020
期刊:针刺研究
影响因子:--
作者:王婧吉;吴生兵;程红亮;杨超;陈赟;杨骏
通讯作者:杨骏
Effect of moxibustion on long-term memory in vascular dementia model rats
艾灸对血管性痴呆模型大鼠长期记忆的影响
DOI:10.1016/j.wjam.2019.04.008
发表时间:2019-03
期刊:World Journal of Acupuncture-Moxibustion
影响因子:0.7
作者:Li Yue;Yang Jun;Gui Li;Fan Yinqiu
通讯作者:Fan Yinqiu
Moxibustion therapy improving delayed memory deficits via promoting neurogenesis and angiogenesis of hippocampus in a vascular dementia rat model
艾灸疗法通过促进血管性痴呆大鼠模型海马神经发生和血管生成改善迟发性记忆缺陷
DOI:10.1007/s11726-019-1140-9
发表时间:2019-12
期刊:Journal of Acupuncture and Tuina Science
影响因子:0.5
作者:Yin-qiu Fan;Jun Yang;Jing-cheng Cui;Pin Wang;Yue Li;Li Gui
通讯作者:Li Gui
DOI:--
发表时间:2019
期刊:辽宁中医药大学学报
影响因子:--
作者:桂利;李悦;樊吟秋;杨骏
通讯作者:杨骏
化瘀通络灸调控"神经血管小生境"促VD大鼠神经新生胞外信号蛋白cross-talk机制
  • 批准号:
    81473785
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    75.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    杨骏
  • 依托单位:
化瘀通络灸法治疗血管性痴呆的促血管生成机制研究
  • 批准号:
    30973801
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    31.0万元
  • 批准年份:
    2009
  • 负责人:
    杨骏
  • 依托单位:
国内基金
海外基金