从Dscam识别与细胞吞噬途径解析WSSV结构蛋白诱导对虾特异性抗病毒感染的分子机制

对虾白斑综合征病毒（WSSV）是威胁我国乃至世界对虾健康养殖的重要病原之一。虽已有研究表明病毒结构蛋白（VP28、VP19等）能有效保护对虾特异性抗WSSV感染，然至今仍缺乏对此分子机制的认知。本项目以最新发现的无脊椎动物基于免疫球蛋白超家族（Dscam）的适应性免疫体系为研究基础，主要研究及探索：（1）VP28诱导凡纳对虾体内Dscam基因在转录水平的RNA选择性剪接，差异分析不同免疫刺激后对虾血淋巴Dscam可变区cDNA序列多样性及特征；（2）以酵母双杂交系统及GST pull-down方法研究Dscam变构体与免疫原结合的特异性；（3）靶向干涉Dscam基因的siRNA设计及对虾体内RNA干涉，差异分析Dscam-siRNA干涉组和未干涉对虾组经VP28蛋白免疫刺激的血淋巴细胞对WSSV的吞噬功能，阐明Dscam与细胞特异性吞噬WSSV的相关性及VP28蛋白激发细胞特异性吞噬WSSV过程中Dscam的介导作用。由此，从Dscam特异性识别及介导效应的角度揭示结构蛋白诱导对虾特异性抗病毒感染的分子机制。本项目突破局限于“封闭受体阻止病毒入侵”和“天然免疫及信号途径”两个方面对此机理的现有研究，提出从适应性免疫角度探索特异性保护机制。通过本项研究，可望为对虾疫苗研发及病害有效防治提供重要理论依据，在一定程度上有利于形成对虾适应性免疫理论基础。