课题基金基金详情
基于三螺旋DNA的免疫-PCR新分析方法研究
结题报告
批准号:
21375153
项目类别:
面上项目
资助金额:
85.0 万元
负责人:
凌连生
依托单位:
学科分类:
B0403.谱学方法与理论
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
肖志友、张红、李宇彬、张曼君、郭晓婷
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
很多蛋白质是一些癌症和传染性疾病的标志物,而它们的浓度在疾病发展的早期阶段非常低。因此在后基因组时代,建立和发展蛋白质的超高灵敏的检测方法显得极为重要。 本项目拟将荧光探针Ru-dppz配合物类发光探针用于检测PCR产物,并将这些探针用于免疫-PCR分析,提高免疫-PCR技术的灵敏度。探索各种基于三螺旋DNA 形成原理的双螺旋DNA 序列识别分析新方法,并将新方法用于PCR产物检测;进一步与免疫-PCR技术相结合,建立基于三螺旋DNA的免疫-PCR新分析方法。将新建立的免疫-PCR 分析方法推广用于不同疾病抗原的检测,发展和建立不同疾病抗原的高灵敏检测方法。
英文摘要
Many proteins are biomarker of some cancer and contagious disease, but their concentration is very low at the early period of disease. Therefore, it is of importance to develop supper-sensitive method?for dection of protein on the postgenome era.? The project will detect PCR product by using Ru-dppz complexes as luminescent probe, and the luminescent probe will be further used in immuno-PCR to improve its sensitivity. Different new methods for sequence-specific recognition of dsDNA will be developed based upon triplex formation, then applied it to detect PCR product, further combined with immnuo-PCR, to establish novel immuno-PCR sensor based upon the formation of triplex DNA. The new immuno-PCR sensors will be extended to detect the antigen of different diseases, to develop new methods for ultrasensitive dection of antigen for different diseases.
我们采用二茂铁修饰的分子信标为探针,根据三螺旋DNA的形成原理建立序列识别双螺旋DNA的电化学传感器。与杂交链反应放大(HCR)技术相结合,提高检测双链DNA的灵敏度。将三螺旋DNA的序列识别能力与链置换核酸等温放大技术和核酸内切酶放大技术相结合,分别建立检测SV40病毒和HIV病毒的荧光传感器,为SV40 和HIV病毒的检测提供全新的方法。利用Ag+ 对CGC三碱基体的识别和增稳作用,建立由Ag+/Cysteine调控的基于三螺旋DNA的逻辑门。进一步将HCR放大技术与三螺旋DNA相结合,实现对HCR过程的动态调控。以三螺旋DNA为枢钮,将HCR放大技术和其他放大技术相结合,分别建立循环肿瘤DNA , lef7a miRNA和ATP的比色传感器。利用目标物诱导邻近DNA杂交手段特异性识别目标分子,并通过链置换扩增反应对检测信号循环地进行放大,分别建立链霉亲合素和凝血酶的荧光传感器。基于DNA修饰的银板的分离特性和金纳米粒子放大效应的原子吸收光谱法特异性识别单链DNA。. 我们发明了一种多倍PCR 扩增方法(multi-fold PCR),使每个循环的扩增倍数大于2,突破现有的PCR技术的放大极限。利用聚合酶链式反应(PCR)扩增技术和三螺旋DNA的形成原理,建立了一种基于PCR-免疫的检测凝血酶的荧光检测法,线性范围为1.0×10-12 mol/L - 1.0×10-7 mol/L,检出限为261 fmol/L。根据适配体对凝血酶的特异性识别和GOx对葡萄糖的催化氧化,以2,3-二羟基-3-(4-羟基苯基)丙酸(HPPA)为探针,建立凝血酶的荧光传感器。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Triplex DNA logic gate based upon switching on/off their structure by Ag+/cysteine
基于 Ag/半胱氨酸打开/关闭其结构的三重 DNA 逻辑门
DOI:10.1039/c5an01371b
发表时间:2015
期刊:Analyst
影响因子:4.2
作者:Xiao Zhiyou;Zhu Houya;Xin Aiping;Li Yubin;Ling Liansheng
通讯作者:Ling Liansheng
Sequence specific recognition of HIV-1 dsDNA in the large amount of normal dsDNA based upon nicking enzyme signal amplification and triplex DNA
基于切口酶信号放大和三链体 DNA 对大量正常 dsDNA 中的 HIV-1 dsDNA 进行序列特异性识别
DOI:10.1016/j.talanta.2017.05.043
发表时间:2017
期刊:Talanta
影响因子:6.1
作者:Zhu Houya;Zhang Manjun;Zou Li;Li Ruimin;Ling Liansheng
通讯作者:Ling Liansheng
Ultrasensitive colorimetric detection of circulating tumor DNA using hybridization chain reaction and the pivot of triplex DNA.
使用杂交链式反应和三链体 DNA 枢轴对循环肿瘤 DNA 进行超灵敏比色检测
DOI:10.1038/srep44212
发表时间:2017-03-09
期刊:Scientific reports
影响因子:4.6
作者:Li R;Zou L;Luo Y;Zhang M;Ling L
通讯作者:Ling L
A colorimetric sensing platform based upon recognizing hybridization chain reaction products with oligonucleotide modified gold nanoparticles through triplex formation
基于通过三链体形成识别寡核苷酸修饰的金纳米颗粒的杂交链式反应产物的比色传感平台
DOI:10.1039/c6nr09089c
发表时间:2017-02-07
期刊:NANOSCALE
影响因子:6.7
作者:Zou, Li;Li, Ruimin;Ling, Liansheng
通讯作者:Ling, Liansheng
DOI:10.1016/j.bios.2015.06.070
发表时间:2015-12-15
期刊:BIOSENSORS & BIOELECTRONICS
影响因子:12.6
作者:Li, Zongbing;Miao, Xiangmin;Ling, Liansheng
通讯作者:Ling, Liansheng
实时动态光散射定量PCR仪的研制
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    60万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    凌连生
  • 依托单位:
三螺旋DNA及其与蛋白质(酶)相互作用的纳米光学传感器的研究
  • 批准号:
    20975116
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    35.0万元
  • 批准年份:
    2009
  • 负责人:
    凌连生
  • 依托单位:
基于三螺旋DNA的纳米生物传感器的研究
  • 批准号:
    20645002
  • 项目类别:
    专项基金项目
  • 资助金额:
    8.0万元
  • 批准年份:
    2006
  • 负责人:
    凌连生
  • 依托单位:
国内基金
海外基金