青蒿琥酯增强β-内酰胺类药物抗MRSA的作用机制研究

控制MRSA感染是临床治疗的难题，寻找新的有效抗菌药物或者具有提高现有抗菌药物作用的药物具有重要意义。基于我们前期发现青蒿琥酯增强β-内酰胺类药物抗菌作用的工作基础上，以PBP2a为靶点，研究青蒿琥酯增强氨苄西林抗菌作用的机制。首先，采用生物传感器技术，将重组的PBP2a包被于生物传感器表面，观察青蒿琥酯与PBP2a的结合情况及亲和力；然后，采用实时PCR技术和Northen-blot杂交实验在基因水平进一步明确青蒿琥酯与氨苄西林配伍前后mecA基因的表达情况，并采用Western-blot实验在蛋白水平进一步明确PBP2a的表达情况；在此基础上，采用反义寡核苷酸技术封闭mecA基因及其调节基因MecR1以封闭mecA基因的表达，观察mecA基因和PBP2a的表达情况，尤其是青蒿琥酯与氨苄西林配伍后的抗菌增强作用的变化，进一步明确青蒿琥酯的作用靶点，为阐明青蒿琥酯的作用机制奠定基础。