基于重组MS2噬菌体样颗粒的肿瘤RNA疫苗的研究
批准号:
81171981
项目类别:
面上项目
资助金额:
60.0 万元
负责人:
李金明
依托单位:
学科分类:
H1806.肿瘤免疫
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
张永强、张萍、孙宇、宋利琼、李文丽、孙艳丽、谢洁红、常乐
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中文摘要
和DNA疫苗相比,RNA疫苗携带的基因不会整合到宿主细胞基因组,也不会引起自身免疫病或抗DNA抗体等副作用。寻找能提高RNA稳定性和体内转运效率的生物安全性递送载体是RNA疫苗研究的关键。噬菌体具有遗传驯良、高生产量、费用较低、物理稳定性高和高生物安全性等特性,已被应用于DNA疫苗递送和基因转移载体的研究。目前国内外还没有噬菌体介导的RNA疫苗体内递送及免疫学研究的相关报道。本项目通过酿酒酵母表达系统、大肠杆菌表达系统、体外培养的树突状细胞及小鼠结肠癌/前列腺癌动物模型,从细胞和动物水平以及体外和体内试验等多方面探讨重组MS2噬菌体样颗粒作为RNA疫苗的新型递送载体的递送机制、免疫效果和免疫保护能力。进一步探讨树突状细胞靶向性和细胞因子嵌合RNA的使用对这种新型RNA疫苗的免疫增强效果。从而为RNA疫苗的研制提供新的递送平台,为肿瘤等疾病的治疗提供新的方法和思路。
英文摘要
本项研究采用分子克隆和酿酒酵母真核表达技术,以MS2噬菌体衣壳蛋白为包装蛋白,成功构建及表达装载肿瘤相关抗原,癌胚抗原(CEA)、前列腺癌特异性抗原(PAP)等mRNA片段的病毒样颗粒(VLPs),应用于结肠癌/前列腺癌的预防治疗。在结肠癌防治方面,内含CEA mRNA片段的VLP,细胞水平检测到CEA抗原表达,对相应结肠癌细胞株存在杀伤效果。利用其免疫结肠癌小鼠动物模型后,可观察到VLP具备抗肿瘤效果,荷瘤小鼠生存期明显延长。在前列腺癌防治方面,分别制备内含PAP抗原、GM-CSF佐剂,以及PAP-GM-CSF融合基因mRNA片段的VLPs,体外实验证实产生相应抗原。利用其免疫前列腺癌荷瘤模型后,内含PAP-GM-CSF mRNA的VLP,可成功诱导产生IL-12、THF-α,有效激活树突状细胞,佐剂GM-CSF促进树突状细胞成熟,进而有效摄取加工抗原,产生IgG抗体及T细胞免疫应答,其中以Th1型和CTL细胞免疫应答为主。与其它制备成功的VLPs相比,内含PAP-GM-CSF mRNA的VLP具备有效延迟肿瘤作用,体内实验证明其良好的抑瘤效果。在此基础上,制备内含microRNA序列的肿瘤治疗性VLPs。首先制备内含miRNA-23a前体的VLPs作为前列腺癌治疗性疫苗,细胞水平证明VLPs中包裹的治疗性microRNA前体可加工为成熟的microRNA,促进细胞凋亡,发挥抗肿瘤效果,且未见明显细胞毒性。综上所述,重组MS2 噬菌体病毒样颗粒可作为肿瘤RNA疫苗的有效递送载体,体内、体外发挥抑制肿瘤效果,为RNA疫苗提供了一种新的递送途径和方法。
期刊论文列表
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A novel method to produce armored double-stranded DNA by encapsulation of MS2 viral capsids.
一种通过封装 MS2 病毒衣壳生产装甲双链 DNA 的新方法。
DOI:10.1007/s00253-015-6664-4
发表时间:2015-09
期刊:Applied microbiology and biotechnology
影响因子:5
作者:Zhang L;Sun Y;Chang L;Jia T;Wang G;Zhang R;Zhang K;Li J
通讯作者:Li J
Multicolor flow cytometry analysis of the proliferations of T-lymphocyte subsets in vitro by EdU incorporation
EdU Incorporation 对 T 淋巴细胞亚群体外增殖的多色流式细胞术分析
DOI:10.1002/cyto.a.22113
发表时间:2012-10-01
期刊:CYTOMETRY PART A
影响因子:3.7
作者:Sun, Yanli;Sun, Yu;Li, Jinming
通讯作者:Li, Jinming
Messenger RNA vaccine based on recombinant MS2 virus-like particles against prostate cancer
基于重组 MS2 病毒样颗粒的抗前列腺癌信使 RNA 疫苗
DOI:10.1002/ijc.28482
发表时间:2014-04-01
期刊:INTERNATIONAL JOURNAL OF CANCER
影响因子:6.4
作者:Li, Jinming;Sun, Yanli;Wang, Lunan
通讯作者:Wang, Lunan
DOI:--
发表时间:2016
期刊:Analytica Chimica Acta
影响因子:6.2
作者:Le Chang;Jinming Li;Lunan Wang;
通讯作者:
基于MS2-motif信号放大的CRISPR/dCas9荧光原位标记检测技术的研究
- 批准号:81974319
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:李金明
- 依托单位:
内含miRNA122和miRNA224海绵体肝细胞癌特异靶向病毒样颗粒及其伴随检测的研究
- 批准号:81772273
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:56.0万元
- 批准年份:2017
- 负责人:李金明
- 依托单位:
类风湿关节炎抗IgG/CCP双特异自身抗体产生机制和意义研究
- 批准号:81271915
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:82.0万元
- 批准年份:2012
- 负责人:李金明
- 依托单位:
MS2茎环在含长片段RNA病毒样颗粒表达中的作用研究
- 批准号:30972601
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:8.0万元
- 批准年份:2009
- 负责人:李金明
- 依托单位:
表达转导肽且内含siRNA重组噬菌体颗粒构建及HCV干扰研究
- 批准号:30571776
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:25.0万元
- 批准年份:2005
- 负责人:李金明
- 依托单位:
病毒样颗粒在核酸扩增检测标准品和质控品研究中的意义
- 批准号:30371365
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:20.0万元
- 批准年份:2003
- 负责人:李金明
- 依托单位:
国内基金
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