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藏药湿生扁蕾抑制结肠癌微环境中BMSCs恶性转化的作用及机制研究
结题报告
批准号:
81560717
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
39.0 万元
负责人:
景明
依托单位:
学科分类:
H3301.中西医结合基础理论
结题年份:
2019
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
王雅莉、张艳霞、李硕、陈正君、刘雪枫、卢年华、赵慧巧、刘娟娟
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中文摘要
骨髓间充质干细胞(BMSCs)良好的迁移性及肿瘤趋向性,成为结肠癌生物治疗的首选载体,但结肠癌微环境中,BMSCs可能发生恶性转化,其应用的安全性备受关注,能否找到一种抑制“恶变”、维持“干性”的方法,迄今并不清楚。藏药湿生扁蕾具有利湿、清热、解毒之功效,切合结肠癌湿热蕴结中医病机。我们前期研究发现,藏药湿生扁蕾可调控结肠癌相关基因CyclinD1等的表达、诱导人结肠癌SW480细胞凋亡,可调控致癌信号分子IL-6的表达、抑制IL-6/STAT3信号通路活化。我们推测藏药湿生扁蕾通过“调和”结肠癌微环境,可能有防止BMSCs恶变的作用。为证实该假说,我们拟建立大鼠体外BMSCs与SW480细胞共培养体系及裸鼠体内实体瘤模型,观察BMSCs恶变及体内成瘤情况,探讨藏药湿生扁蕾对结肠癌微环境中BMSCs恶性转化及体内成瘤的抑制作用及其机制,为BMSCs应用的安全性研究提供中医药的思路与方法。
英文摘要
Because of the favourable transfer and tumor tropism, BMSCs became the first choice carrier on biotherapy of colon carcinoma.But in colon carcinoma microenvironment, BMSCs malignant transformation possiblely happen, so a lot of attention were paid to the security of the application of BMSCs. It,s uncertain if we can find a method which could inhibit canceration and retain dry nature. Gentianopsis paludosa(Munro)Ma has the effect of clearing heat-toxin , eliminating dampness and detoxication, which consistent with the pathogenesis of colon carcinoma in chinese medical science. In previous study ,we found that, Gentianopsis paludosa(Munro)Ma could regulate the expression of colon carcinoma associated gene CyclinD1, induce apoptosis of human colon carcinoma cell SW480, regulate the expression of carcinogenesis signaling molecule IL-6, suppress the signal channel of IL-6/STAT3. We presume Gentianopsis paludosa(Munro)Ma have the effect of prevent BMSCs canceration by harmonize colon carcinoma microenvironment. In order to confirm this hypothesis, we plan to establish the synthem of rat BMSCs and SW480 co-culture in vitro and establish solid tumor model in nude mouse, observe canceration of BMSCs and state of tumor growth in vivo, investigate the inhibitory effect and the mechanism of Gentianopsis paludosa(Munro)Ma on the malignant transformation of BMSCs and tumor growth in vivo in colon carcinoma microenvironment, to provide traditional Chinese medicine method to the safety research of BMSCs application.
骨髓间充质干细胞(BMSCs)良好的迁移性及肿瘤趋向性,成为结肠癌生物治疗的首选载体,但结肠癌微环境中,BMSCs可能发生恶性转化,能否找到一种抑制“恶变”、维持“干性”的方法,迄今并不清楚。本研究拟建立大鼠体外BMSCs与SW480细胞共培养体系及裸鼠体内实体瘤模型,观察BMSCs恶变及体内成瘤情况,探讨藏药湿生扁蕾乙酸乙酯部位对结肠癌微环境中BMSCs恶性转化及体内成瘤的抑制作用及其机制。MTT法筛选出湿生扁蕾体外实验高、中、低给药剂量分别为200,100,50μg/mL;Transwell小室建立SW480和HMSCs体外共培养条件为SW480细胞和HMSCs细胞比例为10:1,共培养7天;流式细胞术实验表明,GPE可剂量依赖式将共培养后的HMSCs细胞阻滞在G1期,进而降低S期和G2/M期细胞数量;Transwell侵袭、迁移实验表明,共培养组HMSCs比正常对照组HMSCs侵袭、迁移能力显著提高,而GPE干预组可显著降低共培养后的HMSCs细胞的侵袭、迁移能力,高剂量组最显著;AO-EB双染试剂盒检测细胞凋亡实验表明,共培养后,HMSCs细胞可能存在恶性转化,而GPE干预后,共培养的HMSCs细胞表现为早期凋亡;RT-PCR和Western blot试验表明,共培养组HMSCs中TERT和C-myc基因、蛋白较正常对照组均高表达,GPE干预呈现剂量依赖式低表达;ELISA、RT-PCR和Western blot试验表明,共培养组的HMSCs中IL-6/STAT3信号通路过度激活,其下游基因Bcl-XL和CyclinD1也呈高表达趋势,GPE干预组呈现剂量依赖式降低IL-6/STAT3信号通路相关基因及蛋白表达,高剂量组抑制作用最为显著;HE染色试验结果显示,GPE处理组可不同程度降低恶性转化后的HMSCs的病理改变;免疫组化试验表明,GPE抑制恶性转化的HMSCs的成瘤体积与调控IL-6/STAT3信号通路的过表达有关。我们可以得出,湿生扁蕾具有抑制共培养的HMSCs恶性转化的作用,该抑制作用可能与调控C-myc、TERT和IL-6/STAT3信号通路的过表达有关。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2018
期刊:甘肃科技
影响因子:--
作者:赵慧巧;卢年华;张旭东;柳娜;景明
通讯作者:景明
DOI:--
发表时间:2018
期刊:甘肃科技
影响因子:--
作者:赵慧巧;王雅莉;寇 亮;卢年华;景 明
通讯作者:景 明
DOI:--
发表时间:2018
期刊:中药材
影响因子:--
作者:张旭东;柳 娜;景 明;刘雪枫
通讯作者:刘雪枫
DOI:--
发表时间:2018
期刊:中药药理与临床
影响因子:--
作者:赵慧巧;卢年华;张旭东;柳娜;芦彦兆;陈正君;刘雪枫;张艳霞;景明
通讯作者:景明
DOI:--
发表时间:2017
期刊:甘肃中医药大学学报
影响因子:--
作者:陈正君;卢年华;赵慧巧;芦彦兆;陈晖;景明
通讯作者:景明
从结肠上皮细胞自噬调节肠道菌群诱导的Treg/Th17细胞失衡探讨湿生扁蕾提取物治疗UC的免疫机制
  • 批准号:
    82160854
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    34万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    景明
  • 依托单位:
从TGF-β1/Smads/Snail信号通路调控CEC自噬障碍导致EMT探讨湿生扁蕾提取物治疗UC肠纤维化的作用机制
  • 批准号:
    81860788
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    37.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    景明
  • 依托单位:
藏药湿生扁蕾结肠靶向给药通过CTGF/Smads信号通路抗溃疡性结肠炎肠纤维化的作用机制研究
  • 批准号:
    81360522
  • 项目类别:
    地区科学基金项目
  • 资助金额:
    47.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    景明
  • 依托单位:
国内基金
海外基金