Interaction of the COOH-terminal Transactivation Domain of p65 NF-κB with TATA-binding Protein, Transcription Factor IIB, and Coactivators (*)

Interaction of the COOH-terminal Transactivation Domain of p65 NF-κB with TATA-binding Protein, Transcription Factor IIB, and Coactivators (*)
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p65 NF-κB COOH 末端反式激活结构域与 TATA 结合蛋白、转录因子 IIB 和共激活剂的相互作用 (*)

DOI:
--
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发表时间:
1995
影响因子:
4.8
通讯作者:
P. Baeuerle
P. Baeuerle
中科院分区:
生物学2区
文献类型:
--
作者:
M. Schmitz;Gertraud Stelzer;H. Altmann;M. Meisterernst;P. Baeuerle

文献摘要

参考文献

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我们发现,人转录因子 NF-κB p65 亚基的反式激活 COOH 末端在体外可直接结合通用转录因子 TFIIB 和 TATA 结合蛋白(TBP)。 p65 与 TFIIB 的相互作用需要 TFIIB 内最多 COOH 末端的序列重复。从酵母细胞的测定中可以明显看出 TFIIB 与 p65 的功能性相互作用。 COS 细胞中的共转染实验表明,只有 TBP 的过表达才能进一步刺激报告基因的 p65 依赖性反式激活。 TBP 和 TFIIB 的共表达都不能缓解抑制,表明 p65 反式激活中还涉及其他因素。使用高度纯化的因子进行的无细胞测定揭示了从 HeLa 细胞中分离出的至少一种辅因子 PC1 通过 NF-κB 的 COOH 末端激活结构域进行特异性转录刺激。这些数据表明,p65 COOH 末端的有效酸性反式激活结构域能够在功能上招募基本转录机制的各种组件以及共激活子。
We show that the transactivating COOH terminus of the p65 subunit of human transcription factor NF-κB directly binds the general transcription factors TFIIB and TATA-binding protein (TBP) in vitro. Interaction of p65 with TFIIB required the most COOH-terminal sequence repeat within TFIIB. A functional interaction of TFIIB with p65 was evident from assays in yeast cells. Cotransfection experiments in COS cells revealed that only overexpression of TBP was able to further stimulate p65-dependent transactivation of a reporter gene. The coexpression of neither TBP nor TFIIB was able to relieve squelching, indicating the involvement of additional factors in transactivation by p65. A cell-free assay using highly purified factors revealed a specific transcriptional stimulation through the COOH-terminal activation domain of NF-κB by at least one cofactor, PC1, isolated from HeLa cells. These data show that the potent acidic transactivation domains in the COOH terminus of p65 are able to functionally recruit various components of the basic transcription machinery as well as coactivators.
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