Molecular Mechanism of Regulation of the Protein Kinase C-related Kinase 2 (PRK2)

Ziel des vorliegenden Forschungsvorhabens ist，den Molekularen Machismus der ProteinKinase PRK2 and der aktivierenden ProteinKinase PDK1 Sowie die Reguleser Dieser Interaktion aufzuklären.在此基础上，我们提出了一种新的调节机制--AGC-Kinasen，并对其生化特性进行了研究。De für diese Interaktion entschedende Bindungsstelle in PDK1 Well“PIF Bindungstasche”(PIF Bindungstasche)。他说：“这是一件非常重要的事情。”PRKs spelen eine wichtige Rolle bem Wachstum von Prostatakarzinomen(PRK1 And PKN3)and auch in der Mitose(PRK2).PIF-Bindungstasche in PDK1中的PRKs Sind衬底von PDK1和Die Interaction MIT der PIF-Bindungstasche is Vorraussetzung für ihre Phphorylierung.Jedoch nit bekannt的国际关系规则和PDK1。在不同的地方，你可以选择“TURN-MOTIF/ZIPPER”-PUP-LIERRONG Von PRK2，Im Untersched zu and deren AGC-Kinasen，die Interaktion MIT PDK1 Reguliert。我是PRK-调节行为的模型师，也就是PRK2分子间(反式)自体抑制因子。我是Volliegenden Forschungsvorhaben Soll der Machismus der Interaktion zwitchen PRK2 and PDK1 näher Charakterisiert。我们的基因植物在体内死亡在PRK2的基础上，蛋白质外基元、蛋白质外基元和共结晶中的蛋白外基元和相互作用的细节被研究到PRK1中。Schlie？lich Wir Tir Ten，ob die Isoformen PRK1 and PKN3 den Gleichen grundLegenden Regular-Machismus aufweisen，der dch die dech die Untersusuhungen MIT PRK2 characterisiert Wir teen，ob die Isoformen PRK1 and PKN3 den Gleichen grundLegenden Reguline-Machismus aufweisen，der dch die de Untersusuhungen MIT PRK2 Charakterisiert is soll.

Ziel des vorliegenden Forschungsvorhabens ist, den molekularen Mechanismus der Interaktion zwischen der Proteinkinase PRK2 und der aktivierenden Proteinkinase PDK1 sowie die Regulation dieser Interaktion aufzuklären. In den letzten Jahren haben wir den Mechanismus der Regulation verschiedener AGC-Kinasen durch Interaktion mit der aktivierenden Kinase PDK1 entdeckt und biochemisch charakterisiert. Die für diese Interaktion entscheidende Bindungsstelle in PDK1 wird „PIF Bindungstasche“ genannt. Kenntnisse über die molekularen Details der Interaktion von PDK1 mit Substraten sind jedoch nicht vorhanden. PRKs spielen eine wichtige Rolle beim Wachstum von Prostatakarzinomen (PRK1 und PKN3) und auch in der Mitose (PRK2). PRKs sind Substrate von PDK1 und die Interaktion mit der PIF-Bindungstasche in PDK1 ist Vorraussetzung für ihre Phosphorylierung. Die Regulation der Interaktion zwischen PRKs und PDK1 ist jedoch nicht bekannt. In unseren Vorarbeiten haben wir beobachtet, dass die „turn-motif/Zipper“-Phosphorylierung von PRK2, im Unterschied zu anderen AGC-Kinasen, die Interaktion mit PDK1 reguliert. Im Gegensatz zu gegenwärtigen Modellen der PRK-Regulation haben wir auch festgestellt, dass PRK2 intermolekular (in trans) autoinhibiert wird. Im vorliegenden Forschungsvorhaben soll der Mechanismus der Interaktion zwischen PRK2 und PDK1 näher charakterisiert werden. Weiter ist geplant die Oligomerisierung von PRK2 und deren Beteiligung am Aktivierungsmechanismus der Kinase zu charakterisieren, sowie die in vivo-Aktivität von PRK2-Mutanten zu untersuchen. Da PRK2 diejenige Proteinkinase zu sein scheint, die mit höchster Affinität mit PDK1 interagiert, werden wir basierend auf den oben genannten Untersuchungen PRK2-Protein exprimieren, aufreinigen und in Kristallisations- und Co-Kristallisationsstudien mit PDK1 einsetzen, um die molekularen Details der PRK2-Dimerisierung und Interaktion mit PDK1 zu ermitteln. Schließlich werden wir testen, ob die Isoformen PRK1 und PKN3 den gleichen grundlegenden Regulations-Mechanismus aufweisen, der durch die Untersuchungen mit PRK2 charakterisiert werden soll.